求助：如何对混合NK/T细胞进行进一步分群

kobe327292007

如图：左上为NK细胞，右下为T细胞。
我想问一下，有没有办法，将T细胞在不进行磁珠分选的前提下，直接再次对混合NK/T细胞中的T细胞进行分析，比如看下各种T细胞亚群的比例等？

同时NK细胞能不能利用同样的方法进一步分析其膜表面受体表达？

dragonhzqsmmu

didi_zhou 发表于 2013-6-24 21:35

                               
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如果只过一天的话染好色放室温就可以，避光不要洗，上机之前再洗，这样裂红也会更好。当然还要看你用什么 ...

我用的就是普通的ACK裂红液，自己按照protocol配制的

niwanmao

didi_zhou 发表于 2013-6-24 21:37

                               
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这个我要安排下时间，可能没这么快，最近比较忙，准备好了我站内PM您吧。或者我看看其他人有没有时间，您 ...

OK，没有问题，按照您的时间来！

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-24 21:22

                               
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另外请教一下这个CD8/CD56的也是NK细胞？

CD56/CD8这个图也是NK，不过他们划分的似乎太细了，不知道是否有什么特殊含义

didi_zhou

niwanmao 发表于 2013-6-24 21:22

                               
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很漂亮。@didi_zhou  能不能安排个时间，到http://meeting.flowcyto.cn 给我们做个8色或10色流式方面的讲 ...

这个我要安排下时间，可能没这么快，最近比较忙，准备好了我站内PM您吧。或者我看看其他人有没有时间，您看怎么样？

didi_zhou

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-24 21:21

                               
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厉害，学习了，我的标本是放4度冰箱过夜的全血，可能是不新鲜导致的，应该是新鲜分离后即刻染色分析或者 ...

如果只过一天的话染好色放室温就可以，避光不要洗，上机之前再洗，这样裂红也会更好。当然还要看你用什么裂解液，有些裂解液很激烈，要求3个小时内测掉，那就没办法了，只能新鲜的了。
一般来说红细胞很难影响到粒细胞的，应该就是状态不好导致的。

didi_zhou

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-24 21:22

                               
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另外请教一下这个CD8/CD56的也是NK细胞？

哈哈，我只是看到PPT上面有，然后我的结果里面也有就加进去了，具体什么意义我还没考虑过。你看看PPT吧。

niwanmao

didi_zhou 发表于 2013-6-24 20:56

                               
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附件图片是当时用Gallios做10色Panel时候人血的结果，使用Kaluza分析的。
CD16-FITC/CD56-PE/CD3-APC-A70 ...

很漂亮。@didi_zhou  能不能安排个时间，到http://meeting.flowcyto.cn 给我们做个8色或10色流式方面的讲座？

dragonhzqsmmu

didi_zhou 发表于 2013-6-24 21:00

                               
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刚好里面还有个CD8-PB的，同一个结果里面的，一起帮你分析进去，我看看有没有专门做NK的结果帮你看看。
...

另外请教一下这个CD8/CD56的也是NK细胞？

dragonhzqsmmu

didi_zhou 发表于 2013-6-24 20:56

                               
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附件图片是当时用Gallios做10色Panel时候人血的结果，使用Kaluza分析的。
CD16-FITC/CD56-PE/CD3-APC-A70 ...

厉害，学习了，我的标本是放4度冰箱过夜的全血，可能是不新鲜导致的，应该是新鲜分离后即刻染色分析或者染色后多聚甲醛固定后一个批次一起处理？

粒细胞分两群是否可以是红细胞的污染？因为我裂红后感觉离心下来的细胞还有不少红细胞，这种情况是再裂一次还是怎么处理？请教

didi_zhou

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-20 16:02

                               
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这个我自己做的一个标本，CD3-FITC\CD56-PE/CD16-APC

具体的分群方法，还想请高手指点一下

刚好里面还有个CD8-PB的，同一个结果里面的，一起帮你分析进去，我看看有没有专门做NK的结果帮你看看。