MHCI 限制性 CD8 T 细胞是适应性免疫系统的中心效应细胞群之一，有助于抵御病毒、细胞内细菌和恶性细胞。
小鼠常规TCRαβ CD8+ T 细胞可以通过根据Time、FSC/SSC、排除粘连和死细胞、对 CD3ε+ 或 TCR-β+ 细胞进行设门，最后对 CD4-CD8α+ 细胞进行分析。
对 CD3ε+ 或 TCR-β+ T 细胞进行设门是为了排除表达CD8α 的髓系细胞或 NK 细胞。但值得注意的是，这种设门策略仍然会引入一些非常规 T 细胞，例如上皮内淋巴细胞 (IEL)、γδ T 细胞、NK T 细胞和 MAIT 细胞，因为它们有部分亚群会表达 CD8αα 同源二聚体。在一些外周组织(例如小肠)中，这些非常规的 T 细胞群可以占CD8+T的高达 50%。为避免这种错误分类，CD8β抗体应包含在设门策略中，以排除不表达此标记的非常规 T 细胞。
然而，使用 CD8β抗体又带来一个麻烦， 会减少MHCI四聚体的结合，从而限制抗原特异性 CD8 T 细胞的区分。因此，在识别富含非常规 T 细胞群的组织中的抗原特异性群时，应考虑这些因素。
CD8 T 细胞的分化状态由 CD44 和 CD62L 表达定义。 CD8 Tn 细胞是 CD44loCD62Lhi。感染或免疫后，抗原激活的 CD8 T 细胞上调 CD44 的表达并在分化为 CD8 Teff 细胞期间失去 CD62L（CD44hiCD62Llo）。
激活和扩增过程中有两个表面标志物的表达可以指示发育中的 CD8 Teff 细胞的细胞命运，一个是CD127，即促进外周 T 细胞存活的 IL-7 受体 α 链，另一个是KLRG1，在遇到强或持续的抗原刺激时上调，被认为是终末分化的标志物。
反应效应期的抗原特异性 CD8 T 细胞可以表达 CD127 和 KLRG1 的各种组合：

• 更短寿命的效应细胞（SLEC；CD127-KLRG1+），这些细胞在免疫收缩阶段快速凋亡；
• 记忆前体效应细胞（MPEC；CD127+KLRG1-），可能持续存在并有助于记忆。

效应 T 细胞的这些分化阶段保留了一定的灵活性，并且其它分子如 CX3CR1、CXCR3 和转录因子（如TCF1和TOX）可用于区分具有终末效应分化和急性和慢性感染记忆潜力的效应 T 细胞群。

感染解决后，CD8 Teff 细胞群收缩，记忆群体开始形成。与 CD4 T 细胞类似，CD8 Tmem 细胞通常定义为 Tcm 细胞（CD44hiCD62Lhi，尽管此定义还包括虚拟记忆 (Tvm) 细胞）、Tem细胞 (CD44hiCD62Llo)，以及组织驻留记忆细胞 (Trm；CD44hiCD62LloCD69hi)。此外，可以使用CX3CR1 的差异表达识别 CX3CR1int 外周记忆 T 细胞 (Tpm)，这些细胞可以直接进入外周组织进行监测。

CD8 T 细胞从 Tn 分化为 Teff、Tcm、Tem 和 Trm 细胞是由转录因子网络协调的。 Tn 细胞表现出 Bach2 的高表达，保持初始和多能性。激活后，一些转录因子（如 Tbet、Id2、Blimp1）有利于 Teff 细胞分化，而其他转录因子（如 Eomes、Bcl6 和 Id3）有利于 Tcm 或 Tem 细胞分化。 Eomes与 Tcm 细胞发育密切相关，但在 Tvm 细胞发育中也至关重要。此外，Blimp 和 Hobit（T 细胞中 Blimp1 的同源物）介导 Trm 生成。

常规αβ CD8+T各阶段的亚群名称和表型、转录因子，见下表：


信源：Cossarizza A, Chang HD, Radbruch A, et al. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (third edition). Eur J Immunol. 2021;51(12):2708-3145. doi:10.1002/eji.202170126