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小鼠常规αβ CD8+T细胞

发布者: niwanmao | 发布时间: 2022-7-28 20:16| 查看数: 91| 评论数: 0|帖子模式

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MHCI 限制性 CD8 T 细胞是适应性免疫系统的中心效应细胞群之一,有助于抵御病毒、细胞内细菌和恶性细胞。
小鼠常规TCRαβ CD8+ T 细胞可以通过根据Time、FSC/SSC、排除粘连和死细胞、对 CD3ε+ 或 TCR-β+ 细胞进行设门,最后对 CD4-CD8α+ 细胞进行分析。
对 CD3ε+ 或 TCR-β+ T 细胞进行设门是为了排除表达CD8α 的髓系细胞或 NK 细胞。但值得注意的是,这种设门策略仍然会引入一些非常规 T 细胞,例如上皮内淋巴细胞 (IEL)、γδ T 细胞、NK T 细胞和 MAIT 细胞,因为它们有部分亚群会表达 CD8αα 同源二聚体。在一些外周组织(例如小肠)中,这些非常规的 T 细胞群可以占CD8+T的高达 50%。为避免这种错误分类,CD8β抗体应包含在设门策略中,以排除不表达此标记的非常规 T 细胞。
然而,使用 CD8β抗体又带来一个麻烦, 会减少MHCI四聚体的结合,从而限制抗原特异性 CD8 T 细胞的区分。因此,在识别富含非常规 T 细胞群的组织中的抗原特异性群时,应考虑这些因素。
CD8 T 细胞的分化状态由 CD44 和 CD62L 表达定义。 CD8 Tn 细胞是 CD44loCD62Lhi。感染或免疫后,抗原激活的 CD8 T 细胞上调 CD44 的表达并在分化为 CD8 Teff 细胞期间失去 CD62L(CD44hiCD62Llo)。
激活和扩增过程中有两个表面标志物的表达可以指示发育中的 CD8 Teff 细胞的细胞命运,一个是CD127,即促进外周 T 细胞存活的 IL-7 受体 α 链,另一个是KLRG1,在遇到强或持续的抗原刺激时上调,被认为是终末分化的标志物。
反应效应期的抗原特异性 CD8 T 细胞可以表达 CD127 和 KLRG1 的各种组合:
  • 更短寿命的效应细胞(SLEC;CD127-KLRG1+),这些细胞在免疫收缩阶段快速凋亡;
  • 记忆前体效应细胞(MPEC;CD127+KLRG1-),可能持续存在并有助于记忆。

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效应 T 细胞的这些分化阶段保留了一定的灵活性,并且其它分子如 CX3CR1、CXCR3 和转录因子(如TCF1和TOX)可用于区分具有终末效应分化和急性和慢性感染记忆潜力的效应 T 细胞群。

感染解决后,CD8 Teff 细胞群收缩,记忆群体开始形成。与 CD4 T 细胞类似,CD8 Tmem 细胞通常定义为 Tcm 细胞(CD44hiCD62Lhi,尽管此定义还包括虚拟记忆 (Tvm) 细胞)、Tem细胞 (CD44hiCD62Llo),以及组织驻留记忆细胞 (Trm;CD44hiCD62LloCD69hi)。此外,可以使用CX3CR1 的差异表达识别 CX3CR1int 外周记忆 T 细胞 (Tpm),这些细胞可以直接进入外周组织进行监测。

CD8 T 细胞从 Tn 分化为 Teff、Tcm、Tem 和 Trm 细胞是由转录因子网络协调的。 Tn 细胞表现出 Bach2 的高表达,保持初始和多能性。激活后,一些转录因子(如 Tbet、Id2、Blimp1)有利于 Teff 细胞分化,而其他转录因子(如 Eomes、Bcl6 和 Id3)有利于 Tcm 或 Tem 细胞分化。 Eomes与 Tcm 细胞发育密切相关,但在 Tvm 细胞发育中也至关重要。此外,Blimp 和 Hobit(T 细胞中 Blimp1 的同源物)介导 Trm 生成。

常规αβ CD8+T各阶段的亚群名称和表型、转录因子,见下表:
20220728_200253.png

信源:Cossarizza A, Chang HD, Radbruch A, et al. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (third edition). Eur J Immunol. 2021;51(12):2708-3145. doi:10.1002/eji.202170126

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