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小鼠巨噬、DC、单核、中性粒如何设门?以肺组织为例

发布者: niwanmao | 发布时间: 2022-8-2 08:45| 查看数: 164| 评论数: 0|帖子模式

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用流式如何分出小鼠肺组织中的不同细胞类型呢?

方案,要复杂可以很复杂,但要简单,也可以只用F4/80、CD11b、CD11c 和 GR-1来区分不同细胞类型。

小鼠肺组织经过dispase酶消化后,用荧光标记的F4/80、CD11b、CD11c 和 GR-1抗体染色。

下图中(A, B) F4/80+ 、CD11b low 、CD11c+是肺泡巨噬细胞,而 F4/80+ CD11b high CD11c low被分为CD11bhigh 巨噬细胞。 (C) F4/80-/low CD11c high 是DCs,并可细分为 CD11b low/mid DCs 和 CD11b high DCs。 F4/80low CD11c low CD11b mid  是单核细胞。 (D) F4/80low CD11c low CD11b high GR-1 high是中性粒细胞。

zii0120877110002.jpeg


下表是各类细胞的表型总结:
细胞类型表型C57BL/6小鼠参考值%
肺泡巨噬细胞F4/80high CD11blow CD11chigh GR-1low FShigh SShigh3.66 ± 2.25
CD11b high巨噬细胞F4/80high CD11bhigh CD11cvar GR-1low FSvar SSvar7.90 ± 6.97
CD11b low/mid DCF4/80low CD11blow/mid CD11chigh GR-1low FSmid SSmid3.72 ± 1.29
CD11b high DCF4/80low CD11bhigh CD11chigh GR-1low FSlow/mid SSlow/mid10.80 ± 4.42
单核细胞F4/80low CD11bmid CD11clow/mid GR-1low/mid FSlow SSlow16.03 ± 6.78
中性粒细胞F4/80low CD11bhigh CD11clow GR-1high FSvar SSvar34.81 ± 13.44
ATII上皮细胞LBP18high FSmid SShigh (low for other markers)13.11 ± 3.46



信源:Hall JD, Woolard MD, Gunn BM, et al. Infected-host-cell repertoire and cellular response in the lung following inhalation of Francisella tularensis Schu S4, LVS, or U112. Infect Immun. 2008;76(12):5843-5852. doi:10.1128/IAI.01176-08

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