高级流式细胞仪的历史演变和示意图，按时间排序，这里不谈质谱流式、光谱流式和成像流式。但成像流式在原文中有提及，大家可看原文。总体来说，高级流式似乎往成像和无标记方向发展。当然，这个方向主要是在生物医学研究上，而不是临床流式。

(a) 20世纪70年代，常规流式细胞术的基本结构。


(b) 2003，用于细胞分选的微流控流式细胞仪。
优点：成本低；使用方便；灵敏度和分辨率高
缺点：样品处理复杂；芯片容易堵塞



(c) 2004，体内荧光流式细胞术示意图。L1，聚光镜；OL，显微镜物镜（40×，0.6数值孔径，无穷大校正）；BS1，BS2，二向色性分光器；AL1–AL3，消色差；CL，圆柱形透镜；M1–M4，镜子；NDF，中性密度滤光片；BPF，带通滤光片；PMT，光电倍增管。
优点：长期体内细胞动力学监测；高分辨率和高通量
缺点：光漂白和细胞毒性；受到自发荧光的干扰



(d) 2006，集成光声流式细胞术示意图。
优点：无标记识别深层组织中的细胞
缺点：只能检测到具有显著光吸收的细胞



(e) 2013，CV-IVFC示意图和计算机视觉算法流程图。M，镜子；Lin。偏振，线性偏振片；物镜，2X物镜。



(f) 2017，多重SRS-FC。HWP，半波片；L，透镜；AOM，声光调制器；GS，galvo扫描仪；DM，二向色镜；PBS，偏振分光器；SP，短路滤波器。



(g) 2023，基于定量相位成像的流式细胞仪。BSF，分光器光纤；MP，微流控泵；MC，微流控通道；OB，目标光束；MO，显微镜物镜；BE，光束扩张器；RB，参考光束；BC，光束组合器；PC，个人计算机
优点：亚细胞结构的无标记成像
缺点：计算时间长，探测深度小



信源：Pang K, Dong S, Zhu Y, Zhu X, Zhou Q, Gu B, Jin W, Zhang R, Fu Y, Yu B, Sun D, Duanmu Z, Wei X. Advanced flow cytometry for biomedical applications. J Biophotonics. 2023 Jun 1. doi: 10.1002/jbio.202300135. Epub ahead of print. PMID: 37263969.