找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

流式中文网 门户 查看主题

筛查血小板悬液细菌污染的新方法

发布者: niwanmao | 发布时间: 2024-6-23 17:08| 查看数: 112| 评论数: 0|帖子模式

亲爱的FLOWER,加入流式中文网,一起讨论,一起学习,享受更多福利吧!

您需要 登录 才可以下载或查看,没有账号?加入流式中文网

×
为什么要检测血小板悬液中的污染?
- 由于血小板混悬液在室温下储存,细菌更容易滋生,因此输血感染的风险很大。
- 细菌污染可导致输血相关的细菌感染和受血者败血症,具有很高的致死风险。
- 各类指南都建议对血小板悬液进行细菌污染筛查,以预防此类感染。
- 在一些国家,通过检测污染可将血小板悬液的保质期从 5 天延长至 7 天,从而改善血小板悬液制品的可用性。

为什么使用流式细胞仪检测污染?
- 能快速得出结果,可在给患者输血前进行筛查。
- 方法灵敏度高,能检测到低水平的细菌污染。
- 与其他一些方法相比,成本相对较低。
- 流式细胞术可对细菌进行定量分析。
- 可标准化,供血库常规使用。

流式检测的步骤
步骤包括几个关键步骤:
- 血小板裂解: 如果不裂解血小板或使用额外的荧光染料,细菌和血小板在流式上是无法分开的。故使用冻融法(在-80°C下冷冻15-20分钟,然后在室温下解冻),重复3次。
- 离心: 以 500 rpm 的转速离心 3 分钟,将溶解的血小板与细菌分离。
- 染色: 每 100 μl 样品使用 20 μl Syto 9(150 μM/ml)和 20 μl 碘化丙啶(400 μg/ml)。
- 孵育: 避光孵育15 分钟。
- 分析: 使用流式细胞仪获取信号,注意阈值和设门。
2024-06-23_16.57.41@2x.png

性能如何?
- 对于添加了标准菌株的样本:
  • 培养 18 小时后: 浓度仅为1 -10 CFU/ml时,检测不到某些细菌。
  • 培养 96 小时后: 除少数情况外,大多数细菌在所有浓度下都能检测到。

- 对于临床分离菌:
  • 一般需要较长的培养时间(48-96 小时)才能检测到,尤其是在室温下。

- 常规样本:
  • 80个样本中,BacT/ALERT系统识别出一个阳性样本,但流式未能检测出。



可见,该方法有前景,但需要优化培养时间和温度,才能进行可靠的检测。在实践中,流式细胞仪可用作筛选检测,但应与 BacT/ALERT 系统结合使用,以达到最佳的细菌污染检测效果。要可靠地检测出某些细菌,需要较长的培养时间,尤其是在室温下。

更多细节和讨论请进一步阅读:Bolat M, Hatipoğlu H, Köroğlu M, Toptan H, Altındiş M. Use of flow cytometry method to detect contaminations of platelet suspensions. World J Microbiol Biotechnol. 2024;40(7):222. Published 2024 May 30. doi:10.1007/s11274-024-04030-x

最新评论

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-7-15 03:40

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表