核酸检测参考文献

liyouzzz_000

2005-NAR-PCR amplification from single DNA__ molecules on magnetic beads in emul.pdf (504.61 KB, 下载次数: 18)

2011-10-12 09:51 上传

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2003-beaming-Transforming single DNA molecules into fluorescent.pdf (631.71 KB, 下载次数: 17)

2011-10-12 09:41 上传

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2006-BEAMing up for detection and quantification of rare sequence variants.pdf (235.39 KB, 下载次数: 17)

2011-10-12 09:45 上传

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几篇关于关于核酸的beads用流式检测的文献

liyouzzz_000

不知道为什么有的传不上去。

niwanmao

liyouzzz_000 发表于 2011-10-12 09:57

                               
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不知道为什么有的传不上去。

是不是因为文件太大了？如果很大的文件，可以传到115网盘等地方，然后分享链接。

niwanmao

liyouzzz_000 发表于 2011-10-12 09:49

                               
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几篇关于关于核酸的beads用流式检测的文献

大致浏览了下，看得不是很懂，可能是因为以前PCR没学过的缘故，呵呵。
有几个疑问：
1、这个应用似乎挺费时的，在PCR的基础上又增加了磁珠结合、流式检测，跟直接PCR相比有什么优势？
2、你们平时应用在哪些方面？
3、步骤中的第一步需要在磁珠表面结合寡核苷酸，这些寡核苷酸是随便买的到的还是需要专门设计序列的？

liyouzzz_000

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我也是才接触，以前是师姐在做。
1.微乳相PCR可以形成一个个独立隔间，主要目的是进行单分子的扩增，然后将每个磁珠上具有来源于一个模板的指数扩增产物，这样有利于检测一些类似微突变等微量的检测，灵敏度较高。总体感觉比较费时费力。普通的PCR扩增会产生扩增歧视性，有可能检测不到突变等。而且流式是作为一种检测方法，这样可以方便分析单个独立的beads，也利于统计。
2.平时应用，主要是一些检测疾病相关的基因突变，尤其是肿瘤的早期诊断等。
3.序列就是需要扩增的特异性引物，再加上带上一段linker，5'端用生物素标记，生物素可以与beads上的链亲和素共价结合而接到beads上。序列是设计的，一般的公司都可以合成。

haven_t

进行Luminex 培训时听过他们说过这样的技术，应该可以进行高通量检测，就是不知道成本如何？

niwanmao

liyouzzz_000 发表于 2011-10-14 12:22

                               
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我也是才接触，以前是师姐在做。

读这个文献特别费劲，主要是里面很多内容都是有关PCR扩增的，这是我的弱项。

能不能大致给我解释一下大概的步骤？

liyouzzz_000

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个人觉得成本较高。是可以用于高通量，如果能应用起来的话，高通量成本也就低了。

liyouzzz_000

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http://115.com/file/e65xgjvi#
2006-BEAMing_protocol-NatMeth.pdf

这篇是关于beaming的具体操作过程，很详细的~~:)

niwanmao

liyouzzz_000 发表于 2011-10-14 19:50

                               
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http://115.com/file/e65xgjvi#

看了下，看来只能用在一些已知基因突变的领域。不知道我理解的对不对？