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8342 niwanmao 管理组

这是@aivy 站友的实验结果,虽然低、中、高三个浓度没有差别,但是实验结果图形分布还是不错的,作为一种检测活力的方法,值得借鉴。FL1是syto-9,死细菌和活细菌均可染上,而FL2是PI,只会染上膜受损的细菌。

无菌水:

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死活双染:

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低浓度农用链霉素:

2013-04-10_121208.jpg  (2013-4-10 12:21 上传)

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中浓度农用链霉素:

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高浓度农用链霉素:

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原帖:http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2261-1-1.html
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有 14 条回复

推荐 niwanmao 楼主


这样的调法似乎属于过度补偿了,你看原来右下那堆单阳性的信号全被压在X轴外了,况且,整体信号强度都不如没调的时候高。

其实象这种检测,本来就分群的,而且文献中也是这么直接分析的,我觉得没有必要去调它。

2楼 virginforest LV3

FSC阈值是不是可以小点? 为啥只gate   ssc大的那团,下面那群是碎片还是啥?
还有这个FL1-fl2的图中,这个火箭峰这么厉害 ,是不是试剂特异性不好啊,还是补偿没调整? 斜成这样,圈p2和p3不合适吧

3楼 niwanmao 楼主

引用: virginforest 发表于 2013-4-11 14:58
FSC阈值是不是可以小点? 为啥只gate   ssc大的那团,下面那群是碎片还是啥?
还有这个FL1-fl2的图中,这 ...

下面这群通过反设门,认为是碎片,故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状,这是由这两个染料的特性所致,并非是补偿没调整的缘故,是允许的,不必担心。

4楼 wsnxbdr LV2

本帖最后由 wsnxbdr 于 2013-6-19 21:14 编辑
引用: niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55
下面这群通过反设门,认为是碎片,故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状,这是由这两个染料的特性所致,并非 ...

这个火箭状的图,如果将对数坐标改为线性坐标,是不是就会得到两个圆形图?设门计数时应该就更方便了吧

5楼 niwanmao 楼主

引用: wsnxbdr 发表于 2013-6-19 20:14
这个火箭状的图,如果将对数坐标改为线性坐标,是不是就会得到两个圆形图?设门计数时应该就更方便了吧 ...

线性转为log会变圆,而log转为lin只会越来越长。:-)

6楼 wsnxbdr LV2

引用: niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55
下面这群通过反设门,认为是碎片,故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状,这是由这两个染料的特性所致,并非 ...

我刚刚试过,如果做了荧光补偿,这两个火箭状的图可以变成椭圆形的,而且会分别向两个坐标轴移动,变成了可以通过四象限设门分开的样子。

7楼 niwanmao 楼主

引用: wsnxbdr 发表于 2013-6-24 13:48
我刚刚试过,如果做了荧光补偿,这两个火箭状的图可以变成椭圆形的,而且会分别向两个坐标轴移动,变成了 ...

上图看看:)

8楼 wsnxbdr LV2

引用: niwanmao 发表于 2013-6-24 14:12
上图看看:)

两图分别是未设会何荧光补偿和设后的图形。并不是十分完美,但形状确实变化很大。

10楼 wmj123456 LV3

本帖最后由 wmj123456 于 2023-9-21 14:24 编辑
引用: niwanmao 发表于 2013-4-11 15:55
下面这群通过反设门,认为是碎片,故不圈。
至于FL1/FL2点图呈火箭状,这是由这两个染料的特性所致,并非 ...

倪老师,关于SYTO9和PI染料,想请教您几个问题:1SYTO9是可以染活细胞和死细胞的,PI在一定的浓度下,进入细胞内,导致SYT09在细胞内浓度很低,所以分析的时候,就只是认为SYTO9只染活细胞了?
2做SYT09和PI双染的时候,有看到双阳的,请问这群细胞是属于哪种类型的细胞?如下图所示
3双阴性的是什么?这群细菌没有染上任何染料,属于背景?
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