如何尽量减少单核细胞、粒细胞与血小板的粘连 - 流式杂谈和进展

6546 niwanmao 管理组

2013-4-23 11:33:46

在做免疫分型或其它粒、单核方面的检测时，我们发现，单核细胞、粒细胞与血小板的粘连很难避免，经常会在粒、单核细胞上发现CD61等表达。这是很让人头痛的问题，故今日搜了下，发现一些资料，特地翻译了一下，与大家共享。

EDTA是一种强力的钙螯合剂，可使血小板表面的GPⅡb/Ⅲa受体解离，因此，不适合血小板功能的研究。
肝素可结合并活化血小板，导致P选择素表达和单核细胞血小板聚集物的假性增高。
柠檬酸钠相对来说更适合血小板功能方面的检测，然而，柠檬酸钠抗凝的标本抽取后会在15分钟内就开始形成单核细胞－血小板聚集物（Monocyte-platelet aggregates，MPAs），因此标本需要在抽取后尽快固定，否则容易导致MPAs假性增高。

下面是一些做血小板的相关protocol链接，请有权限的朋友上传分享，每篇protocol文档奖励2颗流星：
http://link.springer.com/protocol/10.1007/978-1-62703-339-8_18
https://www.thieme-connect.com/e ... .1055/s-2004-835671
http://www.currentprotocols.com/WileyCDA/CPUnit/refId-cy0615.html

顶

2楼 ddn111 LV3

2013-5-6 11:25:16

第一篇: Platelet Flow Cytometry
相关专帖介绍：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2351-1-1.html

使用流式中文网资料阅读器在线阅读，免流星，内容与附件完全一样，且支持划词翻译（使用帮助）

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（如图片无法正常显示请复制链接：http://www.flowcyto.cn/bbs/reade ... 6wvmwwdVEGXBdSP4Hbo）

◢如确实需要下载附件，请见：

Platelet_fcm.pdf (2013-5-6 15:27 上传)

927.98 KB, 下载次数: 51

，下载需要1颗流星（为什么？）

3楼 dragonhzqsmmu LV3

2013-6-11 09:02:03

学习一下，就是想请教一下各位老师，如何在血小板悬液制备过程中尽量避免血小板的自发凝聚？洗涤过程中吹打轻柔？我之前看到文献中报道加入PPACK（一种凝血酶抑制剂，但价格好像很贵啊），还有用水蛭素或者其他类似的抑制肽，大家有没有什么高招？

4楼 niwanmao 楼主

2013-6-11 09:32:15

引用: dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-11 09:02

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学习一下，就是想请教一下各位老师，如何在血小板悬液制备过程中尽量避免血小板的自发凝聚？洗涤过程中吹打 ...

血小板项目我目前也在考虑开展，所以经验没有，但从相关资料看，抽血、处理时间等因素非常关键。

首先抽血尽量使压脉带压力轻或不用压脉带，用21G大小的针头
其次，相对来说，柠檬酸钠是最好的抗凝剂。
再次，标本尽可能在抽取后15分钟内进行处理。
还有，用HBS稀释亦可减少血小板假性活化的概率。
详见：http://www.flowcyto.cn/bbs/reader.php?mod=flowreader&file=HWqF1zTmFjKvx41xCf7Aijr6wvmwwdVEGXBdSP4Hbo 的第7页

5楼 dragonhzqsmmu LV3

2013-6-11 09:45:38

想请问一下老师，这个标本是从全血中分离的人血小板，用HEPES重悬上机，里面我圈出来的是否就分别代表血小板和红细胞，都是用的指数轴

6楼 niwanmao 楼主

2013-6-11 11:06:19

引用: dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-11 09:45

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想请问一下老师，这个标本是从全血中分离的人血小板，用HEPES重悬上机，里面我圈出来的是否就分别代表血小 ...

从位置看应该是，但是最好再结合相关标记。

7楼深渊色 LV2

2016-11-18 21:28:09

第三篇：Whole Blood Analysis ofLeukocyte-Platelet Aggregates。
支持划词翻译：
https://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=MTE1MTl8ZDM4YWMzNjZ8MTcxMzI1MjUxOXwwfA%3D%3D

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