倪老师,我想收集人新鲜组织样本消化后,流式检测细胞基础钙离子水平,探索疾病条件下细胞内钙的变化。受样本来源所限,不可能一天检测完,需要连续测试两个月。之前用
Fluo-4染同一个细胞系在同一天不同时间、不同的日期多次测钙,可能受环境温度、操作手法误差等多种因素影响,结果挺离散的,感觉不太可信。如果采用
Fluo-4/Fura-red双染,488激发,FITC(530)/PerCP(675) 双通道检测,计算
Fluo-4/Fura-red比率,是不是比较可行?最近见Nature Communications上有文章用共聚焦做了比率测钙,但不知道是不是同一天测试的。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7584603/