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用Calcium Green和Fura Red检测钙离子流动

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发表于 2010-8-1 20:06:12 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2019-10-13 16:57:01 | 显示全部楼层
倪老师,做外周血NK细胞胞内钙离子检测,也用的Fura red 和Fluo 4两种染料,需要把NK分选出来再染色吗?我直接分PBMC,染钙结合染料,然后加CD56和CD3抗体,直接测NK细胞胞内钙,这样可以吗?
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 楼主| 发表于 2019-6-29 13:47:34 | 显示全部楼层
malizewski 发表于 2019-6-29 08:28
倪老师,做Fluo4和Fura red检测细胞内钙离子,Fura red单染阳性率比较低,Fura red和钙离子结合后荧光信号 ...

对的。
你可以采用紫光激发的FuraRed信号除以绿光激发的Fura Red信号,这个比例可以代表钙离子水平(参考文献:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4383592/
如果你这里双染,也可以用增高的Fluor 4荧光强度除以降低的Fura Red荧光强度。

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发表于 2019-6-29 08:28:18 | 显示全部楼层
倪老师,做Fluo4和Fura red检测细胞内钙离子,Fura red单染阳性率比较低,Fura red和钙离子结合后荧光信号会下降,是这个原因吗?还是因为染色操作的原因导致单染管阳性率低呢?



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