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楼主: niwanmao

[视频] 贴壁细胞PI(碘化丙啶)染色操作视频

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 楼主| 发表于 2015-6-26 21:19:22 | 显示全部楼层
椴树 发表于 2015-6-26 15:10
老师,请问我的细胞本身表达GFP和RFP,我想检测细胞周期,可以用PI么?有什么解决方案么? ...

RFP没用过,查了下发射波长是580nm,而PI是620nm,可能在beckman仪器上还是可以调节的,BD可能比较困难。

如果有紫外激光,可以试试DAPI或者Hoechst染料看看;如果没有,可以试试DRAQ5
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发表于 2015-6-26 15:10:25 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-6-23 17:38
染死活细胞的话,PI浓度要低,并且在上机前两三分钟染,染完直接上机,不能洗涤。

PS:下次建议开新帖提 ...

老师,请问我的细胞本身表达GFP和RFP,我想检测细胞周期,可以用PI么?有什么解决方案么?
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 楼主| 发表于 2015-6-23 17:38:27 | 显示全部楼层
PeteM 发表于 2015-6-23 15:28
老师,谢谢您的回答,我同学最近做了一个实验需要染活死细胞,就染了PI 15分钟然后洗掉上机,发现PI 通道 ...

染死活细胞的话,PI浓度要低,并且在上机前两三分钟染,染完直接上机,不能洗涤。

PS:下次建议开新帖提问,谢谢。
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发表于 2015-6-23 15:28:08 | 显示全部楼层

老师,谢谢您的回答,我同学最近做了一个实验需要染活死细胞,就染了PI 15分钟然后洗掉上机,发现PI 通道 unstained 的细胞 直方图 与染了PI的直方图 都只有一个 峰,只是染 PI 的 直方图 PI 峰 相对 与 unstained 的峰 向前 了一些,这是怎么回事?非常感谢您的回答
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 楼主| 发表于 2015-5-6 10:32:39 | 显示全部楼层
PeteM 发表于 2015-5-6 10:30
弱弱的问,这个PI染色目的是啥实验?

检测细胞周期
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发表于 2015-5-6 10:30:47 | 显示全部楼层
弱弱的问,这个PI染色目的是啥实验?
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发表于 2015-5-1 15:53:20 | 显示全部楼层
学习了。谢谢!
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