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7844 niwanmao 管理组


做内分泌研究的朋友应该知道可以用HPa3和HPi2来分选胰岛α细胞和β细胞,以进一步进行实验研究,然而,分选步骤涉及到的细胞制备、分选喷嘴的选择、设门的细节等,可能一般人都还不知道。
流式中文网在此转来Youtube一个精彩的技术型 视频,为您详细呈现胰岛α、β细胞分选的各个细节性protocol,让您看了之后,马上就能上手。

视频截图及说明:
1、流式细胞术的细胞标本制备(供分选用):

2015-04-01_105306.gif  (2015-4-1 13:35 上传)

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2、续上图,流式细胞术的细胞标本制备(供分选用):

2015-04-01_105501.gif  (2015-4-1 13:35 上传)

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3、流式分选仪的参数选择(包括喷嘴和分选PBS以及仪器设置):

2015-04-01_105613.gif  (2015-4-1 13:35 上传)

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4、FSC/SSC散点图的图形设置方法,胰岛细胞的SSC比造血细胞小:

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5、注意区分粘连体,并且要注意宁可圈小,否则容易混进与α、β细胞粘连的其它细胞

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6、死活染料,这是非常重要,无论是分选还是分析都一样:

2015-04-01_105930.gif  (2015-4-1 13:35 上传)

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7、分选β细胞,首先要圈中HPa3阴性的细胞

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8、其次再选中HPi2阳性的细胞,即为β细胞,图中两种圈法均可

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9、分选α细胞,门也不能圈地太大,否则容易不纯

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有 24 条回复

推荐 siyubai1008 LV2


这两个抗体我去ALPCO官网上查了一下 没有找到 还有其他公司有卖这两个抗体的吗?

推荐 niwanmao 楼主

引用: culturelily 发表于 2015-6-3 12:40
最后一张图的补偿都没调吧

PE和APC之间没有补偿:)

2楼 culturelily LV2

最后一张图的补偿都没调吧

4楼 hellenli LV3

倪老师,我想咨询一下,这两个抗体在哪里可以买到,我看几个大的抗体公司都没有的

5楼 niwanmao 楼主

引用: hellenli 发表于 2015-12-9 12:17
倪老师,我想咨询一下,这两个抗体在哪里可以买到,我看几个大的抗体公司都没有的 ...

ALPCO公司有:
http://w.alpco.com/default.aspx?a=psearch&s=HPa3
http://w.alpco.com/default.aspx?a=psearch&s=HPi2

6楼 hellenli LV3

引用: niwanmao 发表于 2015-12-9 19:35
ALPCO公司有:
http://w.alpco.com/default.aspx?a=psearch&s=HPa3
http://w.alpco.com/default.aspx?a=p ...

谢谢倪老师,之前都不晓得这个公司

7楼 siyubai1008 LV2

倪老师 你好 这两个标记物是用来区分鼠的胰岛细胞还是区分人的也可以用?如果不做分选而只做分析 这两个标记物是不是也是可用的呢?

8楼 niwanmao 楼主

引用: siyubai1008 发表于 2017-3-30 09:13
倪老师 你好 这两个标记物是用来区分鼠的胰岛细胞还是区分人的也可以用?如果不做分选而只做分析 这两个标 ...

可以的!

10楼 gxyliu LV2

引用: siyubai1008 发表于 2017-3-31 13:22
这两个抗体我去ALPCO官网上查了一下 没有找到 还有其他公司有卖这两个抗体的吗? ...

您买到这两个抗体了?
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