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我们的老站友,浙江大学邵逸夫医院沈筱芸老师,昨天给我发来一段微信,希望分享一段关于CFSE染色的经验,让各位研究生能够少走些弯路,顺利做完实验,在此表示非常感谢。
这段经验其实很简单,CFSE我们通常希望能够跑出漂亮的多峰图形,父代 ~ 子代,一代代的都分隔清楚(参见
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2370-1-1.html),但是不少FLOWER做的都是肿瘤细胞,结果同样CFSE染色,愣是跑不出多峰图,做到最后,让人怀疑人生。
按照沈筱芸老师的经验,她们做了很多肿瘤细胞,都是如此,最后发现有文献研究了此现象的机制,怀疑与肿瘤细胞主动外排染料导致:
从文献中的图看,虽然没有形成多峰,但是CFSE荧光强度还是能与分裂代数形成一定的线性关系:
相关文献及其附件附于此,在做肿瘤细胞CFSE增殖实验的FLOWER们可下载参考:
细胞增殖实验.pdf
(2020-9-24 16:09 上传)
648.37 KB, 下载次数: 254
这种实战经验,相信是各位FLOWER最需要的,所以期待所有热心FLOWER都能像沈老师那样,乐于分享,帮助世界上正在做流式的其它人。