流式中文网 门户 查看主题

ROS检测步骤,兼顾超氧化物检测

发布者: niwanmao | 发布时间: 2020-12-28 16:12| 查看数: 115| 评论数: 0|帖子模式

亲爱的FLOWER,加入流式中文网,一起讨论,一起学习,享受更多福利吧!

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?加入流式中文网

x
测量ROS的产生或氧化应激有多种方法,其中,使用最广泛的荧光探针是2',7'二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH2-DA),该分子是无色和亲脂的。 DCFH2-DA通过细胞膜进入细胞内,受到细胞内酯酶的作用,脱乙酰化变成DCFH2,无法再透过细胞漏出。多种类型的ROS(过氧化氢,过氧亚硝酸盐,羟基自由基,一氧化氮和过氧自由基)均可对DCFH2产生作用,使其进一步氧化为荧光的DCF(Ex/Em:485–500 nm/515–530 nm),可以在流式细胞仪相应通道检测到(常见为FL1通道)。

超氧化物不会与DCFH2发生强烈反应,但会与另一种探针二氢乙啶(DHE)反应,产生荧光产物2-羟基乙啶(以及其他与荧光无关的超氧化物氧化物)。可以使用518 nm的激发波长和605 nm的发射波长(常为FL2通道)检测DHE氧化的荧光产物。

尽管使用起来相对简单,但要利用这些探针检测ROS需要了解其局限性,并做好染色细节,设置好正确的对照,方可获得有效的实验结果和结论。
游客,本帖隐藏的内容需要积分高于 56 才可浏览,您当前积分为 0

最新评论

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2021-1-21 21:56

Powered by Discuz! X3.4

© 2001-2013 Comsenz Inc.