流式杂谈和进展

用磁珠分选法从PBMCs中成功分选出NK细胞,且纯度达到97%
  • 11楼 yxyyjs
  • 2021-2-18 10:44:17
用过很多Miltenyi的LD柱,重复使用效果感觉不好,每次用新柱比较安全

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其实Miltenyi的这个吸附柱加磁珠用来分选那些比例数量很低的细胞还不错,但是不能大量使用就是使用成本的问题,我们实验室主要用Biotin抗体加Beads 用TIANGEN的磁力架 这样磁力架可以一直用 成本会下来
  • 13楼 lalasa
  • 2021-5-13 13:45:13
Lydia 发表于 2021-2-3 13:36
吸附柱厂商说不建议重复使用,我之前也想过重复使用(想使用完后清洗干净并且高压一下下次用)。但是吸附 ...

我们实验室摸索了吸附柱回收的方法: 柱子用完之后,用无水乙醇冲洗几次,然后立刻放到烘箱中烘干,烘干后再放到铁盒中高压灭菌,随后再烘干,基本不会生锈,再通率也很高,重复使用没有什么问题。

Tips:
1.一定要用无水的而不是95%的,实验做完后立刻冲洗不要拖延,不然会生锈
2. 无水乙醇冲完先别高压灭菌,烘干后再高压灭菌(如果不需要无菌这一步可以省略)

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  • 14楼 lalasa
  • 2021-5-13 13:51:42
大品咿呀哟 发表于 2021-2-26 09:26
其实Miltenyi的这个吸附柱加磁珠用来分选那些比例数量很低的细胞还不错,但是不能大量使用就是使用成本的问 ...

TIANGEN的磁力架分选纯度能达到多少,还有beads用的是哪个厂家的,这位战友能否详细分享一下?
请问您提出来的NK,扩增培养用的是什么培养基呢,方便说吗
甄翔幼 发表于 2021-6-21 20:33
请问您提出来的NK,扩增培养用的是什么培养基呢,方便说吗

可参考这篇文献:
Somanchi, S. S., Senyukov, V. V., Denman, C. J., & Lee, D. A. (2011). Expansion, purification, and functional assessment of human peripheral blood NK cells. JoVE (Journal of Visualized Experiments), (48), e2540-e2540.

主要是培养基中加入10%FBS和IL-2
niwanmao 发表于 2021-6-22 07:54
可参考这篇文献:
Somanchi, S. S., Senyukov, V. V., Denman, C. J., & Lee, D. A. (2011). Expansion,  ...

多谢
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