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[流式protocol] OMIP-071:31参数多色流式、仅用表面标记深入分析T细胞亚群

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 楼主| 发表于 2021-7-26 15:16:39 | 显示全部楼层 |阅读模式

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剖析T细胞的功能多样性对于阐明各种疾病的机制和开发治疗方法至关重要。华南理工大学医学院附属广州市第一人民医院普通外科、广州消化疾病中心的Song-Rong Wang等人设计了一个31个参数(29种颜色)的方案,以表面标记对人类外周血和淋巴结T细胞亚群进行精细分型。除了适应性T细胞标记外,还包括TCR Vα24-Jα18、TCR γδ、TCR Vɑ7.2和CD161,分别用于识别iNKT、γδT和MAIT细胞,它们是固有免疫T细胞。C-X-C趋化因子受体(CXCR3、CXCR4、CXCR5、CXCR6)和C-C趋化因子受体(CCR4、CCR6、CCR7)被包括在内,以便能够识别Th细胞亚群(Th1、Th2、Th17)、Tfh细胞亚群(Tfh1、Tfh2、Tfh17)和具有特定归巢能力的Th细胞。此外,在这个方案中,我们还使用了评估细胞分化(CD45RO、CD7)、活化(CD57、CD95、HLA-DR)和一些共信号分子(PD-1、NKG2D、CD28)表达的标记。特别是,CD69和CD103被包括在内,以进一步分析组织常驻记忆T(Trem)细胞。这个方案可以对人类T细胞亚群进行深入的免疫分型,并可应用于各种免疫相关疾病的监测、预后和机制研究。

方案
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设门
(a) 常见T细胞亚群的31个参数方案的设门策略。
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(b) 对主要的CD4+和CD8+T细胞亚群进行筛选。(c) 通过趋化因子受体对Th/Tfh细胞亚群进行设门。(d) 筛选CD8+T细胞亚群。
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(e) 不同CD4+和CD8+T细胞亚群的共刺激、活化和终末分化/衰竭标志物的表达。
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(f) 外周血和淋巴结组织驻留记忆T细胞的分析。
2021-07-26_15-09-10.jpg

(g) CD4+和CD8+T细胞的趋化因子受体的表达。
2021-07-26_15-09-17.jpg

Wang SR, Zhong N, Zhang XM, Zhao ZB, Balderas R, Li L, Lian ZX. OMIP 071: A 31-Parameter Flow Cytometry Panel for In-Depth Immunophenotyping of Human T-Cell Subsets Using Surface Markers. Cytometry A. 2021 Mar;99(3):273-277. doi: 10.1002/cyto.a.24272. Epub 2020 Dec 10. PMID: 33219622.

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