论坛上有不少站友经常会提T细胞刺激、活化方面的问题,所以感觉有必要介绍一下T细胞刺激活化后的变化规律,这样大家就对实验能够做到心中有数了。
下面的素材摘自Trickett A, Kwan YL. T cell stimulation and expansion using anti-CD3/CD28 beads. J Immunol Methods. 2003 Apr 1;275(1-2):251-5. doi: 10.1016/s0022-1759(03)00010-3. PMID: 12667688.(影响因子2.303分)。有兴趣的站友可直接查看原文。
通过CD3+细胞上CD69的表达来评估T细胞的激活,在用CD3/CD28微球刺激后1小时内开始升高,6小时后达到平稳(图A)。在用抗CD3/CD28微球、PHA和Con A刺激T细胞的头4小时内,观察到低亲和力IL-2受体(CD25)的表达下降,随后至少18小时内稳定上升(图B)。每个淋巴细胞用五个微球刺激,诱导的CD69和CD25表达水平与PHA-L(5 Ag/ml)或Con A(5 Ag/ml)相似,而每个淋巴细胞用一个微球刺激,则水平较低:
每个细胞用一个CD3/CD28微球刺激后,淋巴细胞活力和绝对数量的变化规律,一开始4~5天观察到的细胞活力的降低可能是由于单个核细胞中的非T细胞的死亡。T细胞的快速扩增发生在刺激后的第4天,至少持续到第14天。在这段时间内,T细胞的活力保持在90%以上: