流式中文网 门户 查看主题

流式诊断血小板疾病

发布者: niwanmao | 发布时间: 2021-8-31 15:58| 查看数: 128| 评论数: 0|帖子模式

亲爱的FLOWER,加入流式中文网,一起讨论,一起学习,享受更多福利吧!

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?加入流式中文网

x
用针对表面膜糖蛋白的抗体标记血小板,然后通过流式细胞术分析,是一种快速而灵敏的血小板功能检测技术。 适用于全血、PRP或洗涤过的血小板。 全血需要的样本量很少,因此特别适合新生儿。

流式细胞术在血小板疾病中的适用场景包括
- 监测 GpIIb/IIIa 拮抗剂治疗效果
- 血小板表面糖蛋白遗传缺陷的诊断
- 贮存池病(storage pool disease)的诊断
- 肝素诱导的血小板减少症的诊断
- 斯科特综合征的诊断
等等


全血流式细胞术克服了PRP样本的许多固有问题:

- 更能反映生理功能
- 由于样本操作步骤很少,所以血小板人为活化能够最小化
- 可以同时分析多个血小板受体
- 新的抗体可以很容易地纳入现有的方法
- 只需要少量血液
- 可用于有明显血小板减少症的患者

我们一般采用三种针对特定血小板膜糖蛋白的抗体 [CD41、CD61 和 CD42b],CD41 识别血小板膜糖蛋白 GPIIb(即整合素α IIb 链,它与 GpIIIa「整合素β3 链」非共价结合以形成 GpIIb/IIIa 复合物);CD61 识别血小板膜糖蛋白 GpIIIa(整合素β3 链);CD42b 与巨核细胞和血小板上的 GPIb 反应,CD42b 还抑制瑞斯托菌素依赖的血管性血友病因子(von Willebrand factor, vWF)与血小板的结合和瑞斯托菌素诱导的血小板凝集。


1. 正常血小板:在图1中,正常血小板是根据前向和侧向光散射选择的,并以绿色圈出。 在图2和图3 中,正常血小板呈CD41 (GPIIb) 和 CD61 (GPIIIa) 、CD42b (GPIb) 阳性:
2021-08-31-12-14-12.png

2. 血小板无力症(Glanzmann's Thrombasthenia):在图5和6可见,该患者的血小板CD41、CD61均阴性,说明缺失GPIIb/IIIa复合物,这是血小板无力症的特征。 不过,在图6中可见其CD42b是正常的。
2021-08-31-12-15-06.png

3. 巨大血小板综合征(Bernard Soulier Syndrome):
这里的设门跟前面略有不同,采用CD61圈出血小板。在下图1中,通过CD61/SSC圈血小板,然后图2和图3,可见其CD41和CD42b均表达正常,说明血小板存在正常的GPIIb-IIIa 和 GPIb 受体.
2021-08-31-12-19-36.png

在下图5、6、7则是巨大血小板综合征的患者,该患者的CD41和CD61正常,表明GPIIb-IIIa受体复合物表达正常,但在图6中,有两类血小板,一类(占总血小板的53%)CD61和CD42b均正常,这些是输注到患者体内的正常血小板,而另一类(占47%)则是CD42b(GPIb受体)缺失,是患者自身的血小板。
2021-08-31-12-19-46.png



备注
1. 流式细胞术可用于只有少量血液(如新生儿)时。
2. 与成人血小板相比,静息新生儿血小板的 GPIIb/IIIa 受体表达明显降低。 然而,新生儿血小板显示 GPIa/IIa 和 GPIb 受体表达正常。
3. 流式细胞术也可以通过分析Annexin V与血小板膜磷脂的结合来筛查Scott综合征。
4. 血小板活化可以通过CD62b(即P Selectin,α颗粒膜的一种成分)或 CD63(血小板致密颗粒和溶酶体膜的整合蛋白)检测。
5. 血小板微颗粒可通过流式检测,在止血方面越来越受到关注。
6. 根据 GPIIb/IIIa 的表达,血小板无力症患者通常被分为 1-3 型。
1型:<5% GPIIb/IIIa 表达
2型:5-20% GPIIb/IIIa 表达
3型:GPIIb/IIIa表达正常,但有其它功能失调受体


信源:https://practical-haemostasis.co ... flow_cytometry.html

最新评论

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2021-9-17 03:15

Powered by Discuz! X3.4

© 2001-2013 Comsenz Inc.