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OMIP-079:小鼠脾脏CD4+和CD8+初始/记忆T亚群、Treg及周期

发布者: niwanmao | 发布时间: 2021-11-8 20:32| 查看数: 300| 评论数: 6|帖子模式

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细胞增殖的周期性是生物学的一个基本方面,例如,将神经干细胞与终末分化的神经元区分开来。同样,它是适应性免疫的一个关键特征。两个主要的 T 细胞亚群,CD4 + 和 CD8 + T 细胞,分别具有主要的辅助和细胞毒效应功能。随着时间的推移,记忆 CD4 + 和 CD8 + T 细胞的维持是一个动态过程,依赖于细胞死亡、存活和低水平稳态增殖之间的良好平衡。在稳态条件下,未经处理的小鼠脾脏中的大多数 T 细胞是静止细胞,尽管一小部分会分裂,这可能反映了对未知环境抗原和/或细胞因子驱动的稳态增殖的免疫反应。在没有有意免疫的情况下,这种循环在记忆T细胞中更为突出。此外,一些 Treg 细胞也具有活化/增殖表型,可能反映了成年小鼠的持续自我更新。

事实上,记忆T细胞包含不确定抗原特异性的异质细胞群,这些细胞被认为包括由环境抗原诱导的T细胞,以及一些具有自身配体和/或细胞因子依赖性的未接触过抗原的T细胞。在C57BL/6小鼠中,记忆T细胞高表达 CD44,这是一种与透明质酸结合的粘附分子,因此可以与具有中等/弱CD44表达的初始T细胞区分开来。同样,在人类中,初始和记忆T细胞可以分别通过 CD45RA 的高表达和低表达来识别。

增殖潜力与淋巴结 (LN) 归巢能力、效应功能一起,能有效区分不同记忆T细胞亚群:
- 中央记忆 (CM) T 细胞具有通常由初始T细胞表达的 LN 归巢受体,特别是 CD62L,也称为 L-选择素,一种聚糖受体
- 效应记忆 (EM) T 细胞缺乏CD62L
- T EMRA 细胞,包括重新获得初始表型的效应记忆 T 细胞(人类 CD45RA +,小鼠 CD44 int/low)

基于此,小鼠 CD4 + 和 CD8 + T 细胞中可分出以下四个初始/记忆 T 细胞亚群:CD44 int/low CD62L + naïve、CD44 high CD62L + CM、CD44 high CD62L - EM 和 CD44 int/low CD62L- EMRA。

准确检测体内增殖情况对于跟踪T细胞反应的动态至关重要。小鼠 T 细胞的增殖已通过一些细胞荧光法测量,可分为“静态”(即在分析时提供细胞周期阶段快照)和“动态”(提供分析前几小时或几天内发生的增殖信息)。最广泛使用的“静态”方法依赖于 Ki-67 标记,这是一种支持染色体结构组织以及细胞分裂后细胞核和核仁组装的核内蛋白质。然而,Ki-67表达在除了G0之外的其它各个细胞周期(即在 G1、S、G2 、M 中)。“动态”方法包括羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 (CFSE) 和溴脱氧尿苷 (BrdU) 标记,它们分别识别经历细胞分裂和 S 期的增殖细胞。

2021年10月19日,意大利国家研究委员会(CNR)分子生物学和病理学研究所的安布拉·纳塔利尼等人在Cytometry A上发表了一篇文章,设计并优化了一个比较简单的9色流式方案,能有效区分小鼠中9个T细胞亚群:
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参考文献:Natalini A, Simonetti S, Favaretto G, Peruzzi G, Antonangeli F, Santoni A, Muñoz-Ruiz M, Hayday A, Di Rosa F. OMIP-079: Cell cycle of CD4+ and CD8+ naïve/memory T cell subsets, and of Treg cells from mouse spleen. Cytometry A. 2021 Oct 19. doi: 10.1002/cyto.a.24509. Epub ahead of print. PMID: 34668313.

最新评论

飞翔 发表于 2021-11-11 08:01:49

Treg(CD3 + CD4 + CD8 - FoxP3 + )与 Treg(CD3 + CD4 + CD25+  FoxP3 + )哪个好
半年y 发表于 2021-11-12 23:10:46
飞翔 发表于 2021-11-11 08:01
Treg(CD3 + CD4 + CD8 - FoxP3 + )与 Treg(CD3 + CD4 + CD25+  FoxP3 + )哪个好

后者更好的
Veblen 发表于 2021-11-20 21:53:28
想请问老师:
A中最后一幅图refined singlets的鉴定为什么要排除右下角群体(Ki67lowHoechst+)?
niwanmao 发表于 2021-11-21 08:56:24
Veblen 发表于 2021-11-20 21:53
想请问老师:
A中最后一幅图refined singlets的鉴定为什么要排除右下角群体(Ki67lowHoechst+)? ...

Ki67反映的是增殖,故增殖高、核酸含量呈2倍关系的,是G2/M期,而被排除的那些,对C图的结果无帮助。
Veblen 发表于 7 天前
niwanmao 发表于 2021-11-21 08:56
Ki67反映的是增殖,故增殖高、核酸含量呈2倍关系的,是G2/M期,而被排除的那些,对C图的结果无帮助。 ...

谢谢老师,我想再请问一下C图中Ki67的界限如何界定的呢(也就是十字象限横线的位置)?
niwanmao 发表于 7 天前
Veblen 发表于 2021-11-22 10:23
谢谢老师,我想再请问一下C图中Ki67的界限如何界定的呢(也就是十字象限横线的位置)? ...

伪彩色图的密度,其实已经告诉了我们位置应放何处。
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