换了流式以后，CD3抗体染色居然分不开了。

cellprobe · 发表于 2021-11-28 01:09:06

老师们好，附件有2个PDF。因为图片不好上传，我把图片放入PDF了。
PDF“CFSE细胞增殖-旧数据” ：CFSE和PE-Cy7-CD3标记的PBMC和间充质干细胞共培养，检测干细胞对PBMC增殖的抑制作用；用到的流式细胞仪是GUAVA。能看到不管是PBMC或者PBMC+干细胞，CD3阳性和CD3阴性的细胞群都可以分开。

PDF“CFSE细胞增殖-新数据” ：CFSE和PE-CD3标记的PBMC和间充质干细胞共培养，检测干细胞对PBMC增殖的抑制作用；用到的流式细胞仪是FC500。
在PDF第2页看到，只有CD3抗体染色的PBMC的CD3信号好像是阴性，只有CFSE标记的PBMC的CD3和CFSE好像都是阳性；在PDF的第3和第4页看到CD3
抗体染色分不开阳性和阴性群。

请问是什么原因：FC500的分辨率太低？ “新数据”的CD3电压太低？补偿没有调好？

请求老师们的解答。谢谢。

niwanmao · 发表于 2021-11-28 09:06:44

看了图，首先跟样本活力有关，其次和仪器的电压、分析时的补偿有关。

cellprobe · 发表于 2021-11-28 10:18:01

niwanmao 发表于 2021-11-28 09:06
看了图，首先跟样本活力有关，其次和仪器的电压、分析时的补偿有关。

还不是很清楚哦

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[结构和原理] 换了流式以后，CD3抗体染色居然分不开了。