流式杂谈和进展

流式细胞术检测神经母细胞瘤骨髓累及的重要性
  • 楼主 niwanmao
  • 49202022-2-23 07:53:15
神经母细胞瘤是儿童期最常见的颅外实体瘤(Xie et al.,2018),临床上一般结合疾病阶段、患者年龄、肿瘤组织学和肿瘤生物学等资料对患者进行风险分层以进行治疗(Monclair et al,2008)。 因此,诊断时的准确分期至关重要。

评估骨髓活检和抽吸物最准确地检测骨髓累及,双侧活检和抽吸物的组合可达94.7% 的灵敏度,此外,在组织学评估中加入免疫组织化学可以提高观察者间的一致性(Parsons et al., 2016)。 INRG 分期系统 (INRGSS) 将骨髓浸润定义为通过细胞学、组织学和/或免疫组织化学技术中的一种或组合检测到的任何骨髓抽吸物或活检提示骨髓受累,其中>10% 的骨髓受累是区分 M 期和 MS 期的标准之一(Monclair et al.,2008;Beiske et al.,2009;Burchill et al.,2017)。国际神经母细胞瘤反应标准 (INRC) 的修订版提示骨髓中神经母细胞比例≤5%为残留病灶的标准(Park et al., 2017)。

其它方法,包括流式细胞术、免疫细胞学和定量逆转录酶聚合酶链反应 (RTqPCR),比细胞学或组织学更敏感和更特异 (Tsang et al., 2003; Corrias et al.,2004;Beiske et al.,2005;Ferreira-Facio et al.,2013;Uemura et al.,2019)。流式细胞术是一种经过充分验证的检测血液系统恶性肿瘤骨髓浸润的方法,但其在儿童实体肿瘤中的作用尚未确定。研究表明,流式细胞术可以检测出比组织病理学水平更低的比例(Komada et al.,1998;Tsang et al.,2003;Szantho et al.,2018)。 1998 年开发了第一个检测神经母细胞瘤的三色流式细胞术检测方法(Komada 等,1998)。随后对其进行了优化,如今通过流式细胞术检测 CD45-/CD56+/CD81+/GD2+ 细胞已被作为神经母细胞瘤细胞的表型标准(Swerts et al.,2004;Ferreira-Facio et al.,2013)。在绝大多数神经母细胞瘤细胞中检测到二唾液酸神经节苷脂 (GD2),但也在黑色素瘤、神经胶质瘤和横纹肌肉瘤和骨肉瘤中局部表达 (Beiske et al., 2005; Ferreira-Facio et al., 2013)。重要的是,正常骨髓细胞不表达 GD2 (Swerts et al., 2004)。 CD56表达在外周血中的一部分 CD4+、CD8+ T 细胞和 NK 细胞,以及神经源性细胞和肿瘤中(Beiske et al,2005)。 CD45 存在于所有人类白细胞上,但不存在于神经母细胞瘤细胞中。

Jain N等人比较了流式细胞术、骨髓活检和骨髓常规的结果,对于阴性结果 216/302 (72%),所有三种方法都具有良好的一致性。
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若比较流式细胞术阳性和细胞学和组织学中的一个或两个阳性的样本,阳性结果的一致性为 52/86 (61%),在剩余的样本中,20/86 (23%) 的细胞学和组织学中的一种或两种均为阳性,但流式细胞术为阴性,另外14/86 (16%) 的样本仅流式细胞术阳性。从中可见,三种方法之间存在非常好的互补关系(流式中文网注:实体肿瘤在骨髓中的分布可能呈局灶性,这或许是造成一些样本流式未检测到的不一致的原因,另外抽骨髓时的稀释和破坏,也可能引起流式的假阴性),而流式在微量克隆检测方面,还是对细胞学和组织学有相当大的优势。


References
[1] Jain N, Sattar S, Inglott S, et al. Flow cytometry of bone marrow aspirates from neuroblastoma patients is a highly sensitive technique for quantification of low-level neuroblastoma. F1000Res. 2021;10:947. Published 2021 Sep 21. doi:10.12688/f1000research.53133.1: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35186272/
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