找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

流式细胞术双色散点图定量分析细胞周期所有时相

2013-9-27 12:35| 发布者: niwanmao| 查看: 1662| 评论: 5|原作者: niwanmao

摘要: 一个好的细胞周期分析技术应该是可以同时检测凋亡、G0、G1、S、G2和M期,以及各种细胞表面标记。因此本文作者Christine Vignon等人研发出一种简易的流式细胞术方法,可利用双色散点图区分出各个时相,并进行定量。而 ...
一个好的细胞周期分析技术应该是可以同时检测凋亡、G0、G1、S、G2和M期,以及各种细胞表面标记。因此本文作者Christine Vignon等人研发出一种简易的流式细胞术方法,可利用双色散点图区分出各个时相,并进行定量。而方法中只需用到7-AAD和anti-Ki67、anti-phospho(Ser10)-histone H3,后两者均标记Alexa Fluor 488。分析方式如下图,在这个图中,每个时相均有其对应的位置,根据同型对照设置好位置,即可方便的定量分析各时相比例:
流式细胞术双色散点图定量分析细胞周期所有时相

该方法在临床应用中尤其有用,可分析白血病患者骨髓初发是或经细胞周期调节药物治疗后,白血病细胞的各个细胞周期。
详细方法参见文章正文部分,有意思的是,文中1ml骨髓用20ml氯化铵裂解液裂解10分钟居然是在37度的环境下进行,这个温度我从来没试过,因为氯化铵需要冷藏,温度高容易导致降解,不知道大家有没有试过这个温度?



=====以下为全文免费在线阅读区=====
使用流式中文网资料阅读器在线阅读,免流星,内容与附件完全一样,且支持划词翻译使用帮助

(如图片无法正常显示请复制链接:http://www.flowcyto.cn/bbs/reade ... AE6CthayONVfDpc5b2M)                                       
◢如确实需要下载附件,请见:Flow Cytometric Quantification of All Phases of the Cell Cycle and Apoptosis in .pdf
1

鲜花
1

握手

雷人

路过

鸡蛋

刚表态过的朋友 (2 人)

发表评论

最新评论

引用 dragonhzqsmmu 2013-9-28 21:27
氯化铵保存是在4度,但裂红操作我们都是在室温下进行的,当然因为空调的原因达不到37度,但也差不了太多了,我记得不少老外的protocol里面提及裂红也是在室温下进行的
引用 niwanmao 2013-9-28 21:43

裂解肯定都是在室温下进行的,但是37度确实还是第一次看到。
引用 dragonhzqsmmu 2013-9-28 22:19
这个protocol看了,有点和我们普通的方法有点不同,是先染色胞内再染色表面分子
引用 niwanmao 2013-9-29 08:29
dragonhzqsmmu 发表于 2013-9-28 22:19
这个protocol看了,有点和我们普通的方法有点不同,是先染色胞内再染色表面分子 ...

是的,不过这两个分子(CD45、CD3)刚好丰度高,可能固定对它们影响不大。
引用 cneagle 2017-4-8 11:37
学习了,原来一直用PI染色,看了还有更好的方法啊

查看全部评论(5)

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2025-4-26 00:02

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2025 Discuz! Team.

返回顶部