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ISHAGE方案:我们都做对了吗?

2013-9-10 10:22| 发布者: niwanmao| 查看: 805| 评论: 15|原作者: niwanmao

摘要: 流式细胞术CD34+干细胞计数对于计算外周血干细胞收集时间、评估移植物移植能力非常重要。CD34+干细胞计数有很多设门分析方法,而标准化的ISHAGE方案是目前最常用的,在英国NEQAS CD34+干细胞计数组织中,约81%的 ...
流式细胞术CD34+干细胞计数对于计算外周血干细胞收集时间、评估移植物移植能力非常重要。CD34+干细胞计数有很多设门分析方法,而标准化的ISHAGE方案是目前最常用的,在英国NEQAS CD34+干细胞计数组织中,约81%的参与者采用了该方案。
最近,NEQAS组织中两个实验室的结果一致性较差,于是NEQAS就此进行调查,希望了解其它实验室是否存在类似问题。
本次测试采用了两个经过稳定化处理的标本(稳定措施见:http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1046/j.1365-2141.1998.00784.x/pdf),调查了255个参与实验室,其中196个实验室返回了结果,103个返回了散点图。这103个散点图中,83个使用了ISHAGE方案,而这83个中,36个(43%)ISAHGE方案设门不正确,这些不规范的设门导致结果会比正确设门高2倍左右。
因此,规范普及ISHAGE方案仍然非常有必要。

图1、正确的ISHAGE设门
正确的ISHAGE设门

图2、错误的ISHAGE设门
错误的ISHAGE设门


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最新评论

引用 因知 2014-6-9 09:14
倪老师您好,这是我们做的一个外周血采干的CD34,我看CD45阳性细胞分成了两群,就圈了弱阳性的一群,结果检测结果就很低,有些疑惑,CD45阳性的,不管强弱、都得圈入吗?一直都做的骨髓的CD34检测,动员后的外周血采干CD34检测有什么特殊的吗?
引用 niwanmao 2014-6-9 21:00
因知 发表于 2014-6-9 09:14
倪老师您好,这是我们做的一个外周血采干的CD34,我看CD45阳性细胞分成了两群,就圈了弱阳性的一群,结果检 ...

因知,你这几个文件拷错了,拷了mac系统下的索引文件,请复制那几个不是点号开头的文件。
引用 因知 2014-6-11 20:17
噢,是不是弄成快捷文件了?真是的,看孩子看的总是糊里糊涂的
麻烦倪老师再给看看,谢谢啦
引用 niwanmao 2014-6-11 21:48
因知 发表于 2014-6-11 20:17
噢,是不是弄成快捷文件了?真是的,看孩子看的总是糊里糊涂的
麻烦倪老师再给看看,谢谢啦 ...

为什么是淋巴细胞亚群?
2014-06-11_214824.gif
引用 因知 2014-6-13 09:15
niwanmao 发表于 2014-6-11 21:48
为什么是淋巴细胞亚群?

,真是不好意思,麻烦倪老师了
引用 因知 2014-6-13 09:16
您再给看看吧
引用 niwanmao 2014-6-13 20:47

还是不对,还是复制了mac系统下的快捷文件。
引用 因知 2014-6-15 17:09
是不是我们的电脑有问题了,拷贝过来的都成快捷方式了,真是越是着急,越是出错
再麻烦倪老师给看看吧,{:soso_e112:}
引用 niwanmao 2014-6-15 17:23
因知 发表于 2014-6-15 17:09
是不是我们的电脑有问题了,拷贝过来的都成快捷方式了,真是越是着急,越是出错
再麻烦倪老师给看看吧,{:s ...

对于没有加核酸染料排除死细胞的,基本上设门就如下图这么设:

ISHAGE设门

ISHAGE设门

引用 因知 2014-6-15 22:36
谢谢倪老师,也就是说这个人的CD34不会超过0.20%了?因为我们临床大夫怀疑我的设门有问题,做出来太低,那我就可以拿这个图再跟他们说一下了
引用 niwanmao 2014-6-16 11:51
因知 发表于 2014-6-15 22:36
谢谢倪老师,也就是说这个人的CD34不会超过0.20%了?因为我们临床大夫怀疑我的设门有问题,做出来太低,那 ...

是的,这个跟临床干细胞采集的效率有关。
就像我们这边PBSC采集效率基本上都挺高,但外院有时候送过来的标本就很低。
引用 因知 2014-6-16 21:59
niwanmao 发表于 2014-6-16 11:51
是的,这个跟临床干细胞采集的效率有关。
就像我们这边PBSC采集效率基本上都挺高,但外院有时候送过来的 ...

谢谢倪老师了,看来我还是得再追究一下干细胞采集
引用 1249471827a 2018-9-25 13:37
实在汗颜,11年的文章,快19年了才看到。
流式小白一个,其中有几个图的部分不是太懂,求大神指点。
看文中的意思是P1先找CD45阳性,P2圈CD34强阳,P3再找出其中的弱阳,再结合FSC-SSC的淋巴细胞大小就是CD34+的真实数了。
那P5门开始是为了找绝对计数用的微粒?P6门是在P5门基础上圈的吗?P7门是在P5门下圈的反向门?
引用 niwanmao 2018-9-25 15:24
1249471827a 发表于 2018-9-25 13:37
实在汗颜,11年的文章,快19年了才看到。
流式小白一个,其中有几个图的部分不是太懂,求大神指点。
看文中 ...

P5的目的,是为了圈淋巴细胞区域,分别确定淋巴细胞门的位置P4和碎片门P7的位置,是一个非常有意义的参照门。
P6是绝对计数微球门,是针对所有的信号圈的。
引用 1249471827a 2018-9-25 16:29
niwanmao 发表于 2018-9-25 15:24
P5的目的,是为了圈淋巴细胞区域,分别确定淋巴细胞门的位置P4和碎片门P7的位置,是一个非常有意义的参照 ...

谢谢倪老师!

查看全部评论(15)

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