查看: 87|回复: 3
收起左侧

[凋亡检测] 流式测凋亡

[复制链接]
 楼主| 发表于 2022-8-2 22:49:06 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位老师,大家好,我最近开始学习用流式检测凋亡
试剂盒:BD #559763 (PE-Annexin和7AAD标记)
细胞:原代大鼠心肌细胞 ,贴壁
步骤:1.用过氧化氢H2O2刺激细胞;
          2.  不含EDTA胰酶消化细胞,离心,弃上清;
          3. 加含FBS血清的培养基放培养箱中培养30min; (这一步是看网上朋友说,这样可以一定程度修复机械损伤细胞)
          4. 离心,弃上清培养基,加试剂盒里面的binding buffer, 根据分组,加5ulPE,5ul 7-AAD;
          5. 室温孵育20min,上机(贝克曼仪器)
通道:横坐标用的FL2-PE,纵坐标用的FL3-PC5.5

学生分析结果后,遇到如下问题 :
1. PE单染右下角拖尾很奇怪,不知道是不是我补偿调节有问题呢?
2. 双染的3组,Q3象限细胞拖尾,这是我分析的问题吗? 还是样本或者试剂问题?


谢谢各位老师

FSC-SSC圈门

FSC-SSC圈门

调补偿

调补偿

layout结果

layout结果
Elabscience® 您身边的流式专家,提供免费配色、数据分析,为您提供整体流式解决方案
发表于 2022-8-3 08:05:22 | 显示全部楼层
补偿调过了
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2022-8-3 09:02:05 | 显示全部楼层
PE和PC5.5之间存在过度补偿。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2022-8-3 14:26:24 | 显示全部楼层
需要手动调节补偿
Elabscience® 您身边的流式专家,提供免费配色、数据分析,为您提供整体流式解决方案
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

关闭

本站推荐上一条 /1 下一条

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2022-8-11 08:19

Powered by Discuz! X3.4

© 2001-2013 Comsenz Inc.