CD45 SSH分群问题咨询

弥勒

各位大神，我用三个品牌的CD45抗体做TBNK，CD45跟SSC-H分群时，同样时间，同样样本，同样条件情况下，除了淋巴细胞以外的细胞群，有的是偏左边，有的是偏右边，有没有遇到这种情况，实在想不出是什么原因。

niwanmao

CD45的表达强度，淋巴细胞≥单核>中性粒，所以厂商2的图是有问题的，是否补偿没有调节到位？？？

另外，其它两个图为何CD45被切掉了这么多？

弥勒

niwanmao 发表于 2022-9-19 17:55
CD45的表达强度，淋巴细胞≥单核>中性粒，所以厂商2的图是有问题的，是否补偿没有调节到位？？？

另外，其 ...

倪老师，您好，感谢您的回复。三个品牌的一起上机的，补偿看其他通道的都是正常的，左边这个阈值不知道怎么调整，切掉很多，CD45的比例也相差很大，是同样的样本。补偿正常的情况下，厂商二的CD45是不是有问题？

弥勒

niwanmao 发表于 2022-9-19 17:55
CD45的表达强度，淋巴细胞≥单核>中性粒，所以厂商2的图是有问题的，是否补偿没有调节到位？？？

另外，其 ...

倪老师，您好，非常感谢，我刚才机器又调整了下补偿，是PerCP和PE通道补偿没有调整好，调节好后，CD45位置正确了。但是那个流式图上面被切掉的部分，用flowjo可以复原吗？或者在上机的时候应该注意什么，就不会切掉那么多啊。

niwanmao

弥勒 发表于 2022-9-20 10:13
倪老师，您好，非常感谢，我刚才机器又调整了下补偿，是PerCP和PE通道补偿没有调整好，调节好后，CD45位 ...

可能你们上机的时候，把阈值设成了CD45，这样不太好，容易误伤。

上机的时候，阈值还是改为FSC吧。