YFP流式检测的时候应该用哪个通道

steven

大家好，想问一个基础问题。

现在培养的细胞表达YFP，流式检测的时候应该选择哪个通道呢？或者说和哪些常用染料的检测通道是一致的呢？

Climber

首先最大激发波长是513nm 用488激发是完全可以的，最大发射波长在527nm 对于大多数流式细胞仪而言，其通常对应为488激光的第一个通道，也是FITC对应的通道。FITC通道这个描述并不合理，通道对应的是能够接收一定范围波长的光 而不是特指某个特定的荧光素。这里推荐一个网站可以查到绝大多数荧光蛋白的光谱图 以EYPF示例：https://www.fpbase.org/protein/eyfp/

可以啦希希

和GFP一样的，用FITC就可以吧

steven

可以啦希希 发表于 2022-9-29 13:19
和GFP一样的，用FITC就可以吧

谢谢。确实和GFP很相似，但是稍微有些差异，所以不知道具体该用哪个通道。
如果仪器没有专门的YFP检测通道的话，用FITC通道替代是常规做法吗？

steven

Climber 发表于 2022-10-3 10:49
首先最大激发波长是513nm 用488激发是完全可以的，最大发射波长在527nm 对于大多数流式细胞仪而言，其通常 ...

感谢回复，因为有的流式仪配备专门检测YFP的通道以和GFP区分，所以不敢确定是否可以用FITC替代检测YFP。看了大家的回复，已经比较清晰了，感谢。