多色染色顺序如何操作？

咩咩咩

各位老师，我想问一下，我要染2个指标和PI，我想着有以下2个方案：

1. 2个指标的一抗分别选兔和鼠，同时染一抗，然后同时染对应的荧光二抗
2. 其中1个蛋白买直接偶联二抗的一抗，和另一个未偶联二抗的一抗一起染，然后再染未偶联对应的二抗

由于其中一个指标（不是蛋白，是一个修饰聚合物）没有卖偶联好二抗的一抗，所以得自己染，是鼠源的，在选购荧光二抗时有没有需要注意的地方？

哪一个方法比较可行呢？这样操作荧光会不会互相影响？或者有没有更好的方法推荐？

niwanmao

间标比较难做，建议买一个荧光素偶联试剂盒，将一抗标记上荧光，变成直标。

如果不想这么做，次选的方案，就是先依次一抗、二抗染间标抗体，染完之后，再染直标的抗体。

咩咩咩

niwanmao 发表于 2022-10-15 19:00
间标比较难做，建议买一个荧光素偶联试剂盒，将一抗标记上荧光，变成直标。

如果不想这么做，次选的方案， ...

老师试剂盒有什么推荐的牌子吗

niwanmao

咩咩咩 发表于 2022-10-17 10:33
老师试剂盒有什么推荐的牌子吗

参见下帖：
求助，有无好用的荧光标签试剂盒
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-10126-1-1.html
(出处: 流式中文网)