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[其它] 线粒体膜电位JC-1检测

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 楼主| 发表于 2022-11-12 12:57:10 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星

                               
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各位老师,我对细胞处理之后,凋亡细胞比例增加了,理论上应该是线粒体膜电位降低,绿光强度增加了,但是为什么红光强度也增加了,求red:green比值就反而升高了,与预期趋势相反,请问是什么原因

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发表于 2022-11-12 14:37:09 | 显示全部楼层
补偿是否调到位了?如果有可能,回复时,点击“高级模式”,通过编辑器工具栏上传图片或FCS文件,大家一起看看。
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 楼主| 发表于 2022-11-12 19:11:10 | 显示全部楼层
老师老师,我上传FCS文件了,好几次都是这样,明明从散点图看就有线粒体膜电位下降的趋势,但是红光强度就是升高,而绿光强度升高不明显。我每次都没有调补偿,细胞是空白细胞,没有带任何荧光,我就没调补偿了,感谢老师解答

PC12-JC1-22-11-12.rar

1.72 MB, 下载次数: 3

PC12-JC1-22-11-10.rar

3.51 MB, 下载次数: 7

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发表于 2022-11-13 11:13:49 | 显示全部楼层
linxr8 发表于 2022-11-12 19:11
老师老师,我上传FCS文件了,好几次都是这样,明明从散点图看就有线粒体膜电位下降的趋势,但是红光强度就 ...

下载了第一个压缩包,看到里面两个文件,e和e-dmxaa,不清楚你这是什么细胞,两管之间有什么差异,只能看到两管分群差不多。
让其它人帮忙,很多相关的实验信息,都是需要提供的。
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 楼主| 发表于 2022-11-13 16:37:47 | 显示全部楼层
老师,麻烦再帮忙看下第二个压缩包的文件,这两组做了流式凋亡检测是有差异的,镜下看也是有凋亡细胞比例的差异,实验室其他人不做这个实验也不懂
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发表于 2022-11-14 21:10:11 | 显示全部楼层
linxr8 发表于 2022-11-13 16:37
老师,麻烦再帮忙看下第二个压缩包的文件,这两组做了流式凋亡检测是有差异的,镜下看也是有凋亡细胞比例的 ...

前面不是说了吗,你两组编号分别代表什么意思,需要解释给我们听啊。

细胞是什么细胞?
两组编号分别代表什么?
只染了JC-1还是还染了别的?
电压你是如何定义的?
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发表于 7 天前 | 显示全部楼层
不知道你的分组里有没有对照组。我就当你没有做了。建议你做一下以下这几组:
Blank组:正常培养的细胞,不染色,上机检测。目的是确定JC-1是否还有染色能力;
CCCP组:正常培养的细胞,加CCCP处理20 min,离心弃上清之后JC-1染色,然后上机检测。CCCP可以使线粒体膜电位下降或消失。是线粒体膜电位检测的阳性对照;
Control组:正常培养的细胞,JC-1染色后上机检测。目的是与CCCP组配合,确定JC-1是否工作正常,并确定画门界限。
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