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[标本处理] 老师们,小鼠外周血的裂红液效果不佳

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 楼主| 发表于 2023-1-16 23:35:55 | 显示全部楼层 |阅读模式
2流星
各位老师,最近要用流式测定小鼠外周血中的中性粒细胞,心脏采血至于EDTA抗凝管中,后每50ul全血加入200ul的BD红细胞裂解液室温孵育6-10min,期间不断颠倒混匀,离心后发现整个沉淀都是红色的,刚开始我还以为裂红不彻底,就又裂了一次,并且放在了37摄氏度的水浴箱里,结果也一样,PBS洗涤重悬后的液体也是红色,这是什么原因啊?各位老师有推荐好用的裂红液裂小鼠外周血吗。

流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2023-1-17 07:21:24 | 显示全部楼层
参见:
小鼠外周血的红细胞裂解方法
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-10193-1-1.html
(出处: 流式中文网)
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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
BD的裂解液啊,很好用的,我们经常用来绝对计数,可能的原因是你的样本加的太多了,抗凝全血用10ul足够了,先与10ul抗体混合物孵育之后,然后用200ul的BD裂解液,室温10min,之后加入1倍体积PBS终止裂解上机即可,其实不需要洗的,只要血液采集合格,不存在堵机器的
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