TRBC1与TRBC2双染，对T细胞肿瘤诊断十分重要

niwanmao

在血液肿瘤学领域，T细胞恶性肿瘤的诊断一直是一个挑战。传统的诊断方法往往难以区分恶性T细胞与反应性T细胞，而且现有的T细胞克隆性检测方法存在局限性。然而，随着对T细胞受体（TCR）常β链（TRBC）1和TRBC2的深入研究，我们迎来了一种新的诊断策略，如同λ和κ轻链对于B细胞淋巴瘤的地位一样。

TRBC1与TRBC2：T细胞受体的“指纹”
TRBC1和TRBC2是T细胞受体β链的两个异构体，在T细胞的发育和功能中起着关键作用。在T细胞受体基因重排过程中，TRBC1和TRBC2的选择是相互排斥的，这意味着一个T细胞要么表达TRBC1，要么表达TRBC2，但不会同时表达两者。

克隆号与结合位点：精准识别的关键
TRBC1的克隆号为JOVI.1，而新开发的TRBC2抗体则是通过结构工程和理性设计突变得到的，这些突变位于JOVI.1抗体的互补决定区（CDR）1（T28K和Y32F）和CDR3（A96N和N99M）。这些突变使得原本特异性识别TRBC1的JOVI.1抗体转变为特异性识别TRBC2。


健康人体内的TRBC1与TRBC2表达
通过对39名健康捐献者的血液样本进行流式细胞术分析，研究人员发现，TRBC1和TRBC2在总T细胞、CD4+ T细胞和CD8+ T细胞上表现出多克隆性（polytypic）表达。总TCRαβ T细胞的TRBC2:TRBC1比值中位数为1.6（1.3–2.0），CD4+ T细胞上的比值为1.3（1.2–1.6），CD8+ T细胞则为1.8（1.5–2.7） 。健康人体内的T细胞表现出正常的TRBC多样性。

不同的T细胞功能状态（Naive T、TCM、TEM、TEMRA），不影响TRBC2:TRBC1的比值范围：


胸腺细胞的不同阶段，是多克隆性的：



T细胞肿瘤中的TRBC1与TRBC2
在60个T-NHL临床样本中，所有恶性T细胞都显示出TRBC限制性。52个病例（87%）表现出克隆性的TRBC2:TRBC1比值，而8个病例（13%）则显示出TRBC1和TRBC2的表达缺失。

下图是几个典型的案例：


TRBC1和TRBC2双染相比于TRBC1单染，有什么好处
1. 提高诊断准确性：TRBC1单染由于技术限制或样本处理问题，一些样本可能会出现TRBC1低表达的亚群，会被误认为是克隆性T细胞。而TRBC1/2双染可以清晰地区分TRBC1阳性和TRBC2阳性事件，从而提供更准确的克隆性评估。 见下图：

2. 确定可靶向的TRBC异构体：对于正在开发中的TRBC1或TRBC2靶向疗法，如CAR T细胞疗法，了解肿瘤细胞表达的特定TRBC异构体至关重要。双染方法能够提供这一关键信息，帮助选择最合适的治疗方案。
3. 提供更全面的免疫表型信息：双染方法不仅能够评估T细胞的克隆性，还能够提供关于T细胞亚群的更多信息，如免疫表型和相对丰度，这对于理解T细胞恶性肿瘤的生物学特性和临床行为非常有价值。
4. 有助于区分T细胞克隆的不确定性：在没有T细胞恶性肿瘤的情况下，有时也会出现TRBC1或TRBC2限制的T细胞克隆（T-CUS）。双染方法可以帮助区分这些克隆是否具有临床意义，从而避免不必要的治疗干预。

综上所述，TRBC1和TRBC2双染为T细胞恶性肿瘤的诊断和研究提供了一种更为精确和全面的方法，有助于提高诊断的准确性和治疗的有效性。

参考文献：Horna, Pedro et al. “Dual T-cell constant β chain (TRBC)1 and TRBC2 staining for the identification of T-cell neoplasms by flow cytometry.” Blood cancer journal vol. 14,1 34. 29 Feb. 2024, doi:10.1038/s41408-024-01002-0