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查看: 59|回复: 8

[其它临床检测] HLA-DR-ECD 新VS老产品测试全血差异较大

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发表于 5 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
背景:
试剂:HLA-DR_ECD两个不同批号的产品(下为A组和B组)(抗体交联物两个不同批号)
HLA-DR-ECD产品信息
Type
Conjugate_lot
Conjugate Manufacture  Date
A组(Test)
20011
12/13/2023
B组(Ref)
20010
8/16/2022

血样:健康人全血(EDTA抗凝)

测试方法:CD3_PB+HLA-DR_ECD 复染
问题描述:A组和B组的在淋巴细胞群中阳性细胞百分比差异较大(Total Delta%=9.51%)
B组结果如下:
1.png 2.png 3.png

A组结果如下:
4.png 5.png 6.png

(1)CD3-/HLA-DR+
Test-Ref=35.1%-31.12%=3.98%
(2)CD3+/HLA-DR+
Test-Ref=51.84%-46.31%=5.53%
Total:3.98%+5.53%=9.51%

厂家给的回复如下:
As for your issue, this is due to abrightness difference between the conjugate used for your Ref and the one used for your Test.
Since the HLA-DR staining is not a clearpositive population but a smear population on lymphocyte, having a brighterconjugate leaves to detection of more positive cells.


经验不足,针对厂家给的回复结果没办法判断是否正确,之前猜测是可能是原料批间差异没有控制好导致的。

希望老师们能帮忙答疑解惑,谢谢。




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发表于 5 天前 | 显示全部楼层
这个CV还行的,A组的试剂可以再进行抗体滴定,可把CV控制在10%以内了
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 楼主| 发表于 5 天前 | 显示全部楼层
本帖最后由 落叶风吹 于 2024-7-10 14:44 编辑

倪老师,厂家声称试剂不需要做滴定,他们出厂前已经是滴定到最优浓度了。
而且厂家内控要求是A组 VS B组的阳性细胞比值差异在5%以内,现在已经飙到9.51%了。

厂家回复说亮一点的复合物会影响产品的特异性?是否可靠?
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发表于 5 天前 | 显示全部楼层
落叶风吹 发表于 2024-7-10 14:41
倪老师,厂家声称试剂不需要做滴定,他们出厂前已经是滴定到最优浓度了。
而且厂家内控要求是A组 VS B组的 ...

要么你试一下,同一管染好色的样本,重复采集5次,看看这样重复获取的数据之间,CV怎么样?

如果这样的数据CV都大的话,可能得考虑机器问题了。
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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
有的指标CV20%都可接受。这个估计需要真正做方法学验证看结果来评判了
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2024-7-10 15:15
要么你试一下,同一管染好色的样本,重复采集5次,看看这样重复获取的数据之间,CV怎么样?

如果这样的 ...

好的,倪老师。

另外还有个信息,厂家在Ab纯化过程总,优化了脱盐工艺,HLA-DR在淋巴群中阴阳性分的就不是很清晰,拖带比较严重,脱盐工艺优化是不是也可能会提高特异性。
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 楼主| 发表于 4 天前 | 显示全部楼层
Yuck 发表于 2024-7-11 09:28
有的指标CV20%都可接受。这个估计需要真正做方法学验证看结果来评判了

您说的这个指标是试剂的批内/间CV还是仪器的CV?
国内流式细胞试剂出厂标准是有行标要求的。没有超过15%的,仪器的CV比试剂更低。
参考:YY/T 1184-2010
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发表于 4 天前 | 显示全部楼层
落叶风吹 发表于 2024-7-11 13:06
好的,倪老师。

另外还有个信息,厂家在Ab纯化过程总,优化了脱盐工艺,HLA-DR在淋巴群中阴阳性分的就不 ...

肉眼看似乎差异不太明显。脱盐工艺我不太了解,咋优化了反而拖带吗?
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发表于 3 天前 | 显示全部楼层
落叶风吹 发表于 2024-7-11 13:12
您说的这个指标是试剂的批内/间CV还是仪器的CV?
国内流式细胞试剂出厂标准是有行标要求的。没有超过15% ...

指具体实验。试剂出厂测试不代表最终应用不是。
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