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人类固有样T细胞的新图谱

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发表于 2024-9-15 22:02:02 | 显示全部楼层 |阅读模式

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人类固有样T细胞(Innate-like T cells, Tinn细胞)是一类特殊的T细胞亚群,在机体免疫防御中扮演着重要角色。与传统T细胞(Tconv细胞)不同,Tinn细胞具有天生的非常快速的免疫反应能力,能够迅速应对各种病原体感染。本研究旨在全面解析人类Tinn细胞在胸腺和外周血中的特征,并与小鼠Tinn细胞进行比较,以揭示人类Tinn细胞的独特性。

Tinn细胞(innate-like T细胞)包括以下几种类型:
- iNKT细胞
- MAIT细胞(粘膜相关不变性T细胞)
- γδT细胞

材料与方法
本研究采用多种实验方法对人类Tinn细胞进行深入分析,包括单细胞RNA测序、流式细胞术等。

首先,研究人员从人体胸腺和外周血中分离Tinn细胞。具体来说,就是先将胸腺组织切碎,用缓冲液轻轻挤压以释放出胸腺细胞。然后利用Ficoll-Paque密度梯度离心分离出单个细胞。为了富集特定亚群如MAIT细胞和iNKT细胞,还使用了四聚体染色技术。此外,还对胸腺上皮细胞进行了分离和纯化。

为了验证单细胞测序结果,研究人员还采用流式细胞术对Tinn细胞的表型进行了深入分析。具体步骤如下:首先用特异性抗体标记细胞表面分子,如CCR7、CD3、CD14、CD19、Vα7.2、Vα24、CD4、CD8、TCRγδ、CD161、CD62L等。然后进行细胞固定和穿膜处理,再用特异性抗体标记细胞内分子,如PLZF、Eomes、T-bet、GZMK、GZMB等。最后在Cytek Aurora流式细胞仪上进行检测和分析。

此外,研究人员还检测了人类和小鼠胸腺中CD1d和SLAMF6等分子的表达情况,以探讨其对iNKT细胞发育的影响。

结果
单细胞RNA测序结果显示,大多数出生后胸腺Tinn细胞与naive Tconv细胞相似,只有少数表现出"效应"表型。而成人外周血Tinn细胞则显示出1型和17型混合效应程序,与小鼠Tinn细胞形成明确的效应亚群不同。

进一步分析发现,人类Tinn细胞不像小鼠那样形成不同的亚群,而是表现出1型和17型混合的效应特征。这可能与人类和小鼠Tinn细胞发育过程中的差异有关。

流式细胞术分析结果进一步验证了上述发现。人类胸腺和外周血中Tinn细胞亚群的表型特征,如PLZF、Eomes、T-bet、GZMK、GZMB的表达,与单细胞测序结果高度一致。

此外,研究人员还发现人类和小鼠胸腺中CD1d和SLAMF6的表达存在差异。这可能会影响iNKT细胞的发育过程。



参考文献:Loh L, Carcy S, Krovi HS, et al. Unraveling the phenotypic states of human innate-like T cells: Comparative insights with conventional T cells and mouse models. Cell Reports. 2024;43(9):114705.
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