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[淋巴细胞亚群] 高比例CD4+CD8+双阳性 细胞群

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发表于 2024-9-29 04:33:02 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
由于雪貂的种属原因,无CD45,CD3抗体可用,用有交叉反应的GL7 替代CD45,做gate 后, 再用CD4,CD8分区,发现有很高的CD4+CD8+双阳性细胞。
样品处理和对照: PBMC,compensation 用的是单一的抗体染色Beads,因此在compensation时候选用的是阳性Beads 对阴性Beads,另外加上 Unstain cell 和Live-dye staining cell.
用到的抗体包括:GL7, CD4,CD8a, CD11b, F4/80, Ly6C.
请问这个CD4, CD8的分群大概错在哪里?

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 楼主| 发表于 2024-9-29 04:40:17 | 显示全部楼层
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再次上传图片
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发表于 2024-9-29 07:27:04 | 显示全部楼层

CD4、CD8这些门的名称,为什么跟坐标是相反的?例如CD4+这个门,实际上是CD4-CD8+的。是抗体名称写错了?还是门的名称写错了?

至于雪貂的淋巴细胞中CD4、CD8的分群,和人相似的,如下图(图源:
Flow cytometry of ferret peripheral blood leukocytes. Representative... | Download Scientific Diagram (researchgate.net)
2024-09-29_07.31.08@2x.png

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 楼主| 发表于 2024-9-30 09:42:23 | 显示全部楼层
这个是门标错了。 您这个是引用的2014 Music 的那篇文章的上的图。
我用的抗体是和他一样的,只是标记的荧光不同。 我跟Music交流过,他的CD3的抗体来自Santa Cruz。这个抗体的批次间差异太大,有点问题。我们曾经测试过3个批次的这个抗体,都是无法标记上。 目前已有发表的文献就他这篇文章成功的用过这个抗体。
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