细胞固定后分选还能提RNA吗？

xgndsqq

请教一下大家，小鼠组织分离的细胞固定后再上机分选可以提RNA吗，有没有什么注意事项？

niwanmao

可以提取，但是跟未固定的标本相比，可能会存在RNA降解问题（特别是使用甲醛等交联固定剂，可能会导致RNA的碎片化和降解），另外，甲醛会导致RNA碱基发生化学修饰，并在RNA分子和蛋白质之间以及RNA分子自身之间形成交联。这些交联会将RNA困在细胞质中，所以获得的RNA产量通常较低，而且质量明显降低，很可能会被碎片化。

如果固定不可避免，可以考虑使用乙醇或甲醇固定，虽然对细胞形态影响比较大，但对RNA影响较小。在固定和后续处理步骤中使用不含RNA酶的试剂和缓冲液。