EDU细胞增殖

louxiulan

做悬浮细胞的增殖实验，用的EDU试剂盒，能用70%酒精固定细胞吗，最后用流式上机

niwanmao

一般70%乙醇不推荐用于EDU检测样本的固定，因为EdU检测依赖于掺入的EdU（含有炔基基团）与荧光叠氮染料之间的点击化学反应。标准方法通常优先考虑保持细胞/核的形态，并确保掺入的EdU对这种反应的最佳可及性。通常建议：
1、首先进行交联固定：如多聚甲醛（PFA）或甲醛（通常在PBS中浓度为1-4%）作为初始固定步骤。可以更好地保存细胞结构。
2、破膜： 在固定细胞后，使用基于含有皂苷或Triton X-100的缓冲液破膜，使得反应组分（催化剂、荧光叠氮化物）有效地进入细胞和细胞核。

如果使用70%的乙醇可能会导致EdU炔基基团的可及性保存不佳；可能会降低点击反应的效率，导致荧光信号降低。