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本帖最后由 sdl1991shi 于 2025-5-2 17:14 编辑
我一直有一个疑问,很多教程都说SSC和FSC通道中左下角靠近0位置的都是细胞碎片,但是我在流式圈门树突状细胞时,大多数的树突状细胞cDC1和cDC2都集中在左下角。
想请大家帮忙看看,其中,BV421是死活染料,APC是CD11c,APC-R700是MHCII,BV650是XCR1(cDC1),Percp-cy5.5是CD172a(cDC2)
问题:1.想知道是不是大多数DC细胞都在左下角这个问题,因为很多人都告诉我左下角都是细胞碎片,我想知道细胞碎片也可以染色成功,最后被圈门吗
2.中间这一群是不是就代表着死细胞所在的位置
3.如果DC真的在SSC和FSC左下角的位置,我不明白它为什么会这么靠下,和电压没什么关系,因为我在至少3个流式分析仪和分选仪上机,都是在最下方,而且我电压不低啊
4.究竟应该按照单染管的界限圈门,还是按照FMO管的位置圈门
在BV650:cDC1亚群中CD80的圈门位置:按照图4的单染管圈在10*3次方的位置,按照CD80的FMO管圈在接近0次方的位置,为什么单染管和FMO管的圈门位置会差这么多。
在PerCPCY5.5:cDC2亚群中,单染管CD80的阴阳性群在10*3次左右的位置分群明显,但在全染管和FMO管中cDC2亚群几乎是阴性的的,没有阳性细胞,这是为什么呢,这些都来自于同一只小鼠的脾脏啊,是因为我用了的染料有4种都是BrilliantViolet 大分子染料的原因吗
恳请各位大佬帮忙解答一下,非常非常感谢各位了,谢谢,谢谢
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