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[细胞周期] DOS诱导细胞的凋亡和周期实验,分组问题请教。

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发表于 昨天 17:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
请各位老师帮忙看看,谢谢。
构建了可诱导表达X蛋白的肿瘤细胞系,慢病毒载体自带EGFP,想检测X对细胞恶性表型的作用。
凋亡和流式实验选择了赛默飞Annexin V-APC/PI试剂盒,想避开EGFP的干扰。
目前有5组细胞:U87,U87-vector,  U87-vector+DOS,U87-X,U87-X+DOS,请问该选那几组细胞?主要是搞不清用哪组来做补偿?(注:DOS诱导EGFP和目的蛋白的表达)




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 楼主| 发表于 昨天 17:37 | 显示全部楼层
@niwanmao 麻烦版主看看,谢谢
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发表于 昨天 19:47 | 显示全部楼层
实验组选择:
U87 - 作为阴性对照,不含任何外源表达
U87-vector+DOS - 载体对照组(诱导表达EGFP)
U87-X+DOS - 实验组(同时诱导表达X蛋白和EGFP)

按此实验组设置,对于补偿,可设置:
U87细胞 - 不加任何染料,用于了解空白位置,主要是确认电压是否合适,不建议用于设门。
U87细胞 + 仅PI染色 - 用于PI单染补偿
U87细胞 + 仅Annexin V-APC染色 - 用于APC单染补偿
U87-vector+DOS细胞不加染料 - 用于EGFP荧光补偿
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