CD47与急性髓系白血病的预后相关性

niwanmao

为什么要研究CD47在AML中的价值？

急性髓系白血病（AML）是成人中最常见的急性白血病，诊断中位年龄为68岁，5年总生存率仅30%，老年患者甚至不足10%。尽管化疗和靶向治疗不断进步，但耐药和复发仍是巨大挑战。因此，寻找新的预后标志物和治疗靶点至关重要。

CD47，一种广泛表达于正常细胞的跨膜糖蛋白，通过与巨噬细胞表面的SIRPα结合，传递“不要吃我”信号，从而抑制吞噬作用。然而，肿瘤细胞常“劫持”这一机制，通过高表达CD47逃避免疫清除。既往研究表明，AML患者中CD47高表达与预后不良相关，但不同研究的结果存在矛盾，且缺乏标准化的检测方法。例如：
- Majeti等（2009）发现CD47高表达的AML患者总生存期更短；
- Galli等（2015）通过免疫组化（IHC）发现CD47与原始细胞比例相关，但与生存无关；
- Marra等（2023）指出CD47表达因基因亚型而异，在预后良好组中更高。

这种不一致性促使意大利Siena大学团队开展本研究，通过流式细胞术系统评估CD47在AML原始细胞中的表达，再次确认其与临床结局的关系。


研究团队对35例新诊断AML患者（排除急性早幼粒细胞白血病。中位年龄70岁，62.8%为新发AML，37.2%为继发性AML）的骨髓样本进行流式分析，具体步骤如下：

1、样本制备与抗体染色  
- 抗体组合：  

• PerCP Cy5.5标记的CD34抗体（设门标记原始细胞）；  
• V500标记的CD45抗体（区分白细胞亚群）；  
• PE标记的CD47抗体（检测目标蛋白）；  
• 阴性对照：PE标记的同型对照抗体（排除非特异性结合）。  
  

- 细胞悬液与抗体孵育后，使用BD FACS Lyric流式细胞仪检测。

2、仪器校准与质量控制  
- 校准激光和液流参数，确保检测稳定性；  
- 每日运行微球校准，验证荧光强度和灵敏度。

3、设门策略与数据分析  
- 第一步：通过FSC/SSC散点图排除碎片，筛选单个核细胞；  
- 第二步：CD45 vs. SSC散点图中区分原始细胞（CD45低表达）和淋巴细胞（CD45高表达）；  
- 第三步：CD34阳性进一步确认AML原始细胞群；
- 第四步：对比CD47-PE与同型对照的荧光强度，计算中位荧光强度（MFI）；  
- 第五步：将AML原始细胞的MFI与残留正常淋巴细胞对比。



结果
所有患者原始细胞均表达CD47，MFI中位数16.8（范围2–693.63），仅5例（14.3%）AML原始细胞的CD47表达高于淋巴细胞。

1、CD47与临床参数的相关性
- 正相关因素：  

• WBC计数（rs=0.403, p=0.016）；  
• 骨髓原始细胞比例（rs=0.494, p=0.003）；  
• 外周血原始细胞比例（rs=0.482, p=0.003）；  
• LDH水平（rs=0.382, p=0.028）。  
  

- 与以下因素无相关性：ELN风险分层、基因突变、PD-L1表达。

2、生存分析：CD47是独立危险因素
- 总生存（OS）：中位23个月，CD47 MFI每升高1单位，死亡风险增加4%（HR=1.04, 95% CI:1.01–1.08, p=0.047）；  
- 多变量分析：CD47（HR=1.01, p=0.003）和ECOG评分（HR=30.50–982.64）独立影响生存；  
- 预测能力有限：ROC曲线下面积（AUC）较低（死亡0.57，复发0.64），无法确定有效截断值。

3、治疗反应与CD47无关
- 完全缓解（CR）率48.6%，但CD47高表达组未显示更差反应；  
- 靶向CD47的药物（如magrolimab）在本队列中未显著改善结局。


CD47如同AML细胞的“隐身斗篷”，帮助它们逃避免疫追击。尽管靶向CD47的疗法仍在探索中，但“未来的战场可能不仅在于阻断‘不要吃我’信号，更在于重塑整个肿瘤微环境的免疫生态。”

参考文献：Sammartano V et al. Prognostic value of CD47 overexpression measured by flow cytometry in acute myeloid leukemia. Annals of Hematology (2025).