29色单管全光谱流式细胞术，同时检测AML MRD、白血病干细胞与血液稀释

niwanmao

急性髓系白血病（AML）是一种异质性极高的血液肿瘤，其治疗后复发风险与微小残留病变（MRD）密切相关。研究显示，MRD阳性患者的5年无病生存率仅为20%，而MRD阴性患者可达70%。因此，精准检测MRD已成为指导治疗决策（如造血干细胞移植、靶向治疗）的核心环节。然而，传统多参数流式细胞术（MFC）面临三大挑战：
1. 多管操作低效：

• 欧洲白血病网（ELN）推荐的MRD检测需4–5管分别评估白血病相关免疫表型（LAIP）和"不同于正常"（DfN）克隆。
• 白血病干细胞（LSC）需额外单独一管检测，每管需采集≥100万白细胞（诊断时）或≥500万白细胞（随访时），对样本量要求高。
• 例如，一项典型的五管方案需重复使用CD45、CD34等骨架标记，导致试剂冗余和成本增加。
  

2. 血液稀释问题被忽视：

• 骨髓抽吸过程中，外周血混入会导致MRD比例被低估。研究显示，血液稀释可使MRD检出率下降30–50%。
• 传统MFC缺乏血液稀释评估，可能导致假阴性结果。
  

3. 灵敏度瓶颈：

• 传统MFC的检出限（LoD）为0.1%（即10⁻³），但更低水平的MRD（如10⁻⁴）亦具有预后意义。
  

全光谱流式细胞术（SFC）的出现提供了突破口。SFC可同时区分40+种荧光染料，理论上可将多管检测整合为单管。此前，已有19色和27色SFC方案用于AML MRD检测，但均未解决LSC和血液稀释的同步评估。

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