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Fc阻断后仍有明显非特异性荧光,你可能需要注意一下荧光素的选择

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发表于 2025-10-15 15:53:26 | 显示全部楼层 |阅读模式

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在一次看似寻常的实验中,丹麦奥胡斯大学的流式细胞术研究团队偶然发现了一个令人困惑的现象:健康人的外周血单个核细胞(PBMCs)中,单核细胞居然对CD206呈阳性反应。CD206,也就是巨噬细胞甘露糖受体,通常是巨噬细胞的标志,而不是单核细胞的。实验用的抗体是BioLegend公司生产的鼠抗人CD206 PE-Cy7抗体(克隆15-2)。按照文献,单核细胞本不应表达CD206,这种“假阳性”显然不合常理。

研究团队起初怀疑实验出现了技术性偏差,于是重新设门、重复染色,并更换了抗体。结果令人吃惊:同一个克隆的抗体,如果换成APC荧光标记,就能得到符合预期的结果——CD206只在单核来源的巨噬细胞(MDMs)上阳性,而在PBMCs上完全阴性。再用另一家公司的CD206 PE抗体(克隆19–2,BD Biosciences)验证,也是一致的结论。问题似乎出在那支“PE-Cy7”上。

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于是,研究的焦点转向荧光素本身。

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