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[结构和原理] 对于光谱流式的几个疑问

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发表于 3 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
1建立参考光谱库的时候,如果使用的样本是肺脏,可以换成脾脏样本做单染管入库吗?不同组织样本的同一个荧光抗体的荧光指纹一样吗?还是说需要先做一遍才好确认

2如果做的是20色方案,前期进行抗体滴定的时候,譬如样本体积选的200ul,最佳抗体用量分别是1ul,2ul这些,但是最后在全染管中,还是选择样本体积200ul,加上抗体的用量(按照一个抗体最佳用量1ul,至少是20ul抗体量),这个体系下会影响抗体染色效果吗?那如果是50色的方案,最终体系也会变化,会影响染色效率吗
3合格光谱的判断,是看光谱的形状以及peak峰的位置,想问下,光谱形状中的每个小格譬如在B2通道的红色,绿色,黄绿色的方块怎么理解?方块的高低可以说明什么?为什么强度从0到103次方中间都没有小方块,该怎么解释?如下图的光谱图所示

光谱.png
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发表于 前天 15:51 | 显示全部楼层
1、不同组织样本可以尝试,但是一定要先跟荧光流式对比过才行。 一般建议最好是同种样本类型建立参考光谱库最好。
2、抗体最佳用量,会有一个范围,通常可用。
3、红、黄、绿,代表的是每个峰强度值的变异范围,红色是核心值或中位值
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