造血干细胞计数的一些问题

zark_00

最近在做猴的造血干细胞计数，用全血单平台ISHAGE法，效果很不好，用的BD的猴用抗体，最后CD34+阳性无明显事件（构不成群体，一眼看过去不成群）而我设置的CD45+事件数已经收集到了50W个，总事件数经常收集到了200W左右。这样的话我认为就不是事件收集少了的原因。
贝克曼有个造血干细胞计数试剂盒给出了用正常人血做的范围，0.1至6个/微升，我做出来的结果在范围内，就是不成群，说服不了自己。
猴血是正常猴血，未经粒细胞集落因子或其他动员剂动员。
我想请问有做过的战友么，哪怕是正常人血的也行，请问是怎么处理样品的，难道是不少人说的PMBC？那样损失不少细胞啊，而且感觉不好分。
我用自己的血做过，抗体是人猴通用抗体，也做不出来明显的CD34+群体

niwanmao

我只做过人的，用双平台法，标本都是经过动员的，但基本上也不高，1％左右。所以，我觉得不动员应该是更少，不成群应该是正常的吧。

是否可把原始数据文件压缩一下，传上来看看？

stef1981

我们做的正常人大概只有0.1%左右

动员过后最高1.8%左右

zark_00

好的，我去拷下原始Data文件，一会连图一起发上来

zark_00

好的，我去拷下原始Data文件，一会连图一起发上来

zark_00

原始文件太大，发两张图上来，各位帮忙分析下，图片已付在附件中

niwanmao

stef1981 发表于 2012-1-4 09:29

                               
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我们做的正常人大概只有0.1%左右

动员过后最高1.8%左右

差不多。建议设门图第三个图的位置最好再加一个CD45－SSC的图，进行再次圈CD45＋SSC较小的细胞。

niwanmao

zark_00 发表于 2012-1-4 23:15

                               
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原始文件太大，发两张图上来，各位帮忙分析下，图片已付在附件中

圈门没问题啊。没动员之前应该是很少的。

stef1981

niwanmao 发表于 2012-1-5 08:30

                               
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差不多。建议设门图第三个图的位置最好再加一个CD45－SSC的图，进行再次圈CD45＋SSC较小的细胞。 ...

加了的，图没贴上来

清言

stef1981 发表于 2012-1-4 09:29

                               
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我们做的正常人大概只有0.1%左右

动员过后最高1.8%左右

您好，这个1.8%比值是否是用CD34+数比上CD45+有核细胞数？我也测了动员后的CD34+百分比，比例偏低，只有0.3%-0.5%，方法一样的，就是不知道什么原因？还有，请问形态单个核计数和用流式进行计数还有可比性吗？谢谢~