凋亡实验分组设计

细胞-cell

最近要做流式凋亡试验，检验一个药物的抗凋亡作用，分组搞不明白，请教高手！谢谢！
是不是可以这样设计：一个不加染液组；
                             一个PI组：
                              一个AnnexinV组；
                              一个药物处理双染组；
                              一个不加药物的双染组。     

niwanmao

可以，一批标本中只要有一个单染PI、一个单染AV的就可以。单染PI和单染AV的标本可以是来自同一个标本的，最好挑选那个显微镜下看到凋亡最明显的标本，比较容易调节补偿。

至于第一个不加染液（即空白）对照，可以不做。

vetzcm

我觉得最好用用阳性物做AV，PI单染的处理好些

bluefishcyl

vetzcm 发表于 2012-3-26 21:53

                               
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我觉得最好用用阳性物做AV，PI单染的处理好些

请问一般情况下，怎么获得阳性物？ 用双氧水刺激么？

niwanmao

bluefishcyl 发表于 2012-3-31 08:40

                               
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请问一般情况下，怎么获得阳性物？ 用双氧水刺激么？

能够诱导明显凋亡，就可以。

bluefishcyl

有什么简单方法可以诱导凋亡？？

niwanmao

bluefishcyl 发表于 2012-3-31 13:36

                               
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有什么简单方法可以诱导凋亡？？

你用的是什么细胞？可以查阅相关文献。

蓝白小熊

bluefishcyl 发表于 2012-3-31 13:36

                               
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有什么简单方法可以诱导凋亡？？

听老师说可以直接把细胞放在60°的水浴中，时间当然不能太长，很快就出现凋亡了，不过我没试过。