有谁用过BD的生物素标记的抗体以及链霉亲和素标记的荧光...

youyouwood

在BD的流式抗体中有直接标记荧光素的，例如CD3-FITC，但是也有生物素标记的CD3与链霉亲和素标记的FITC配套使用，请问采用直接标记的抗体可以同时检测几种CD分子，但是生物素标记的抗体一次反应是不是只能检测一种CD分子？这样它的优势在哪里？多谢！

niwanmao

我是这么考虑的：
生物素标记的抗体结合能力与直标的抗体一样，但由于它还要经过一次二抗结合，因此，在结果上可能会比直标的抗体更强，就是说间标有一定程度的放大作用。这是它的优势。
其劣势就是在标记过程中由于多了一步标记，因此影响因素会比直标多，所以稳定性可能会受到影响。

生物素标记的抗体应该是一次只能标记一种，否则你多种抗体都加进去，最后二抗荧光算谁的？你是说吧

youyouwood

niwanmao 发表于 2013-3-16 16:11

                               
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我是这么考虑的：
生物素标记的抗体结合能力与直标的抗体一样，但由于它还要经过一次二抗结合，因此，在结 ...

应该是这样的，可是我又想 像CD3 CD4等这样的分子在细胞表面的表达量较多，直标可以满足需要，在增大信号和一次检测的分子数两个方面权衡，间标的优势是不是不明显？一次只检测一个表面分子结果与同时检测两个或多个结果会有区别吗？

niwanmao

youyouwood 发表于 2013-3-18 12:00

                               
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应该是这样的，可是我又想 像CD3 CD4等这样的分子在细胞表面的表达量较多，直标可以满足需要，在增大信号 ...

对于表达量高的分子，直标方便，而且影响因素少，不建议用间标。
对于表达量低的分子，可以考虑间标，但影响因素较多，故其间洗涤需充分。
一次检测几个分子看你的搭配，一个跟多个同时检测结果不会有区分，但需要视你的需求而定，例如你要检测A、B双阳性的细胞，你就必须双标。

叶绿素

倪老师回复的真详解，有直标就尽量别用间接标记，间标多麻烦啊，呵呵