PI单染测凋亡

mayi009 · 发表于 2013-4-3 23:41:34

麻烦倪老师帮忙分析一下，实验是研究石棉对A549细胞凋亡的影响，由于石棉组细胞悬液中含有大量的石棉颗粒，所以G1峰前面的碎片显得特别多，尝试分析了一下，发现PI-A/PI-w门的位置对结果影响很大，总是拿捏不准！

niwanmao · 发表于 2013-4-4 10:06:19

我是这么做的，由于碎片颗粒和细胞之间的PI分群还是比较清楚的，所以FL2-A/FL2-W的点图还是容易圈的（见下面三个图）。
如果有可能，我建议再加上该细胞特异性的标记，这样先通过该标记设门，就更好的将石棉颗粒区分开来。

石棉1：

石棉1

石棉2：

石棉2

石棉3：

石棉3

mayi009 · 发表于 2013-4-6 13:27:28

嗯，加上该细胞特异性的标记是个好建议，就看能不能找到有特异性的标记！这几组细胞和颗粒还是算分得开，如果连在一起就真的不知怎样画门了。

mayi009 · 发表于 2013-4-17 17:51:57

还有个问题，测了一管顺铂对A549细胞的影响，附图是R2 门的两种圈法，哪个合理？PI-A/PI-W下面那群细胞应该是死细胞和晚期凋亡细胞。

niwanmao · 发表于 2013-4-17 19:13:17

mayi009 发表于 2013-04-17 17:51:57

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还有个问题，测了一管顺铂对A549细胞的影响，附图是R2 门的两种圈法，哪个合理？PI-A/PI-W下面那群细胞应该

当然是下面这个:)

FCS · 发表于 2013-4-18 09:18:56

mayi009 发表于 2013-4-17 17:51

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还有个问题，测了一管顺铂对A549细胞的影响，附图是R2 门的两种圈法，哪个合理？PI-A/PI-W下面那群细胞应该 ...

如果只分析周期的话，我觉得上面就可以了。

FCS · 发表于 2013-4-18 09:20:07

niwanmao 发表于 2013-4-4 10:06

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我是这么做的，由于碎片颗粒和细胞之间的PI分群还是比较清楚的，所以FL2-A/FL2-W的点图还是容易圈的（见下 ...

倪老师，请问R1门怎么确定的？

niwanmao · 发表于 2013-4-18 09:23:53

FCS 发表于 2013-4-18 09:18

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如果只分析周期的话，我觉得上面就可以了。

晕死，昨天在手机上看，上下两个图是反的，所以我说是下面这个，看来手机客户端得改造一下，造成误解了。
应该说在手机客户端上，应该是下面的图，在普通电脑上，是上面这个图。准确的说，就是1.jpg。

niwanmao · 发表于 2013-4-18 09:24:43

FCS 发表于 2013-4-18 09:20

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倪老师，请问R1门怎么确定的？

R1门我圈的时候是尽可能排除碎片，粘连体通过第二个门来排除。

mayi009 · 发表于 2013-4-18 12:15:07

如果是只分析周期当然好画门，问题是FL2-A/FL2-W下端那一团是细胞还是碎片？它在R1门内，应该大部分是细胞吧，我单独圈它时，发现它是在R1下方的，应该是DNA降解得差不多的死细胞或晚期凋亡细胞！？？

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