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[淋巴细胞相关] ficoll分离后流式检测有两群细胞会是神马情况?

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发表于 2013-7-17 16:31:28 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
大侠们,谁有用过ficoll分离过小鼠脾脏淋巴结的单个核细胞,帮我解释下为什么我分离后的细胞上流式检测,有的时候是一群细胞,有的时候是两群?谁能告诉我这两群都有可能是什么细胞?(附流式图)顺便帮我解释下问题症结在哪里,感激不尽感激不尽啊!

图片1.jpg
图片2.jpg
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发表于 2013-7-17 17:24:51 | 显示全部楼层
你是指第二个图吧,最左下是碎片毫无疑问,中间这群应该属于活力差的死细胞。
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 楼主| 发表于 2013-7-17 22:02:37 | 显示全部楼层

哦,原来是这样啊,能指教下,告诉我原因吗?死细胞更小了?
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发表于 2013-7-17 22:07:28 | 显示全部楼层
木石织梦 发表于 2013-7-17 22:02
哦,原来是这样啊,能指教下,告诉我原因吗?死细胞更小了?

标本提取,细胞死亡在所难免,这原因各种各样,细胞不适应提取时的环境、提取时的外力对它造成的伤害等等。

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 楼主| 发表于 2013-7-17 23:22:21 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-7-17 22:07
标本提取,细胞死亡在所难免,这原因各种各样,细胞不适应提取时的环境、提取时的外力对它造成的伤害等等 ...

真心非常感谢,这个问题纠结我很久了……这群小细胞到底神马细胞,原来是死细胞……
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发表于 2013-7-19 10:02:50 | 显示全部楼层
木石织梦 发表于 2013-7-17 23:22
真心非常感谢,这个问题纠结我很久了……这群小细胞到底神马细胞,原来是死细胞…… ...

fig2也是刚分离的细胞么?
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 楼主| 发表于 2013-7-19 22:06:53 | 显示全部楼层
samly0 发表于 2013-7-19 10:02
fig2也是刚分离的细胞么?

是,分了大概5个小时左右。
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发表于 2013-7-22 09:40:39 | 显示全部楼层
这么久啊,分完后有没有取点细胞做台盼兰染色呀?
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 楼主| 发表于 2013-7-23 10:42:15 | 显示全部楼层
samly0 发表于 2013-7-22 09:40
这么久啊,分完后有没有取点细胞做台盼兰染色呀?

说来伤心,如果从ficoll分完后计数及活力测定,大概就3小时。而且当时胎盘蓝测得活力都是95%以上的。从杀小鼠开始算,就有5小时左右。因为我要做磁珠分选,分选后测定分选前后目的细胞的比例,做的染色就成这样了。老师我的QQ是245017891.希望能加您,详细向您讨教磁珠分选的事。最近一直做不好
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发表于 2013-7-25 22:48:16 | 显示全部楼层
活力差的细胞前散为什么会有这么大的差异啊 倪老师 可以试试FL1和FL2散点图看看
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