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[流式分选] 流式分选问题请教,急

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发表于 2013-8-23 14:42:59 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
科里新买的ARIA 2 流式,用BD的鞘液做分选的时候很稳定。液流断点也非常好。但过几天换成PBS后,分选液流不好,卫星滴很多,液滴断点也不是很正常,怎么调也调不好(振幅和频率都不行)。液流图形跟BD操作说明里表示:不正常液流一幅照片几乎一模一样。说明书里说是喷嘴没在中心,但是怎么动喷嘴也不行,换了其他喷嘴也不行。请问什么原因。液流照片在附件。谢谢

70喷嘴

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组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2013-8-23 18:33:43 | 显示全部楼层
分选的问题得请@gcz5340 版主来回答,他用Aria很多年了。
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发表于 2013-8-24 09:51:20 | 显示全部楼层
我觉得你这个很正常啊,断裂位置很稳定,卫星液滴最好4滴左右最后能融合入主液滴。这个图片中液流不在正中心没有关系的,这只是照相机的模拟信号,可以通过调照相机后面的旋钮调位置的。如果nozzle没插在正中心,是不会出现这种稳定液流的。

不知道是不是图片分辨率问题,液滴周围感觉有点毛边,你可以看下sheath filter里面有没有气泡,filter的位置最好也能固定下,液流车震动的太厉害了,可能会影响液流。

总的来说我觉得这个液流做分选肯定没问题的。
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 楼主| 发表于 2013-8-24 21:15:18 | 显示全部楼层
确实液滴有很多毛边,就是和鞘液出来的图不一样,第一个断滴和前一个液滴间有两个断点。卫星6个左右吧,为什么PBS和鞘液会比较大的差别?我看相机RAW图像也这个也差不多。
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 楼主| 发表于 2013-8-24 21:24:44 | 显示全部楼层
原来鞘液的图像是这样的。很稳定。
QQ图片20130824212053.jpg
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发表于 2013-8-25 10:37:27 | 显示全部楼层
不知道你PBS是怎么配置的,过滤过吗。我们都是买Gibco的10升粉剂,配好后高压。如果能抽滤可能效果会更好。

放心吧,只要你这个液流很稳定,做分选是没问题的。

欢迎常来交流啊,坛子里分选的话题太少了。
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 楼主| 发表于 2013-8-25 12:09:20 | 显示全部楼层
嗯。分选确实没什么问题。就是看着不太舒服。卫星滴多。我们是买的鼎国10升配的。0.22抽滤、不做无菌,所以没有高压。
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发表于 2013-8-25 14:39:45 | 显示全部楼层

我们也用过鼎国的,一升一小包,要多少配多少,很方便。后来工程师说国产的可能杂质多,时间长了sheath filter需要经常换,考虑到filter也很贵,后来还是用gibco的。
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 楼主| 发表于 2013-8-26 10:43:58 | 显示全部楼层
gcz5340 发表于 2013-8-25 14:39
我们也用过鼎国的,一升一小包,要多少配多少,很方便。后来工程师说国产的可能杂质多,时间长了sheath f ...

今天开机调试了下,在原来的默认的条件下 频率87下,卫星滴还是太多10个吧。原来也是这个条件卫星4个。今天调成70频率,卫星4个左右,就是卫星液滴大了点。无论什么条件液流都很稳,虽然对分选是没什么影响。短时间内条件变太大,总让我觉得仪器哪有点小毛病。强迫症哈。
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发表于 2013-8-26 11:08:10 | 显示全部楼层
mesunrui 发表于 2013-8-26 10:43
今天开机调试了下,在原来的默认的条件下 频率87下,卫星滴还是太多10个吧。原来也是这个条件卫星4个。今 ...

我没用过分选,但搜了下资料,大致了解了卫星滴的缘故,你采用下图中的步骤清洗一下nozzle试试:

清洗AriaII Nozzle方法

清洗AriaII Nozzle方法
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