eB的破膜剂

ポ奉ポ奉餹

请教下有谁也是用eB的破膜剂，我现在用的震荡混匀的时候很容易起泡，之前是用的BD的没这种现象，对结果有没有影响？

niwanmao

我用的是eB的foxP3破膜剂，也有类似现象，没关系的。
不过老实说，我对比了下，eB的foxP3破膜剂在胞内抗原检测时，还是不够稳定，就是说有时候能出来好的结果，有时候出不来。

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2013-10-20 09:41

                               
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我用的是eB的foxP3破膜剂，也有类似现象，没关系的。
不过老实说，我对比了下，eB的foxP3破膜剂在胞内抗原 ...

老师有没有对比过几家常用的破膜液，比如biolegend、BD、ebioscience和美天旎的效果差别？

我们做表面问题不大，做胞内染色总是有点不放心，有时出不来不知道是自己没刺激出来还是试剂的问题

leosurely

做胞内因子染色还是用两步法推荐的试剂吧，如果检测Treg就用一步法的试剂，这两者还是不要混在一起用

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-10-21 08:50

                               
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老师有没有对比过几家常用的破膜液，比如biolegend、BD、ebioscience和美天旎的效果差别？

我们做表面问 ...

对于破膜剂，我用过Coulter、BD、eBioscience、Caltag（现在已被Invitrogen收购，Invitrogen现在又改为Life）这4家，其它的没用过，总体说来，更喜欢Caltag和Coulter这两家的，稳定性较好，其它的感觉结果不太稳定，就是有时候会做的好，有时候做不好（我是以MPO胞内染色时正常粒细胞作为评估标准）。

＝＝以上意见仅为一家之言，供参考＝＝

leosurely

dragonhzqsmmu 发表于 2013-10-21 08:50

                               
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老师有没有对比过几家常用的破膜液，比如biolegend、BD、ebioscience和美天旎的效果差别？

我们做表面问 ...

做胞内因子染色影响因素确实比较多，有没有激活细胞是关键，所以可以加个表染分子（CD69）做鉴定，确定细胞是否激活

dragonhzqsmmu

leosurely 发表于 2013-10-21 09:08

                               
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做胞内因子染色影响因素确实比较多，有没有激活细胞是关键，所以可以加个表染分子（CD69）做鉴定，确定细 ...

学习了，原来CD69既可以用来评估细胞是否激活，也可以评估破膜的效果

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-10-21 12:20

                               
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学习了，原来CD69既可以用来评估细胞是否激活，也可以评估破膜的效果

不是吧，是不是你意思理解错了啊？CD69应该是只能评估细胞活化效果，而不能评估破膜效果才对啊。

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2013-10-21 14:18

                               
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不是吧，是不是你意思理解错了啊？CD69应该是只能评估细胞活化效果，而不能评估破膜效果才对啊。 ...

？？？我是看我上传的BD公司的protocol得出这个结论的，里面设置了activation control和Intracellular Staining Control，都是用CD69来评估的，我再看看

James006

细胞内部抗原，建议用皂素，温和，效果好，有时候抗原染不出，可能是固定剂的问题，PFA，甲醇，乙醇等固定剂你可以都试试！