PMG系列4：BD核内因子染色流程

niwanmao

PMG系列4：BD核内因子染色流程（注：本系列中文指南为BD Pharmingen公司编译，故方法学中所用到的试剂均为Pharmingen的，如为使用其它公司试剂的，可在我们的protocol专版查找相关方法步骤）

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niwanmao

winteran 发表于 2018-11-21 14:00
请问下老师，这个protocol里面的350g离心转速，是用那种离心15ml离心管的离心机离心的转速吗？如果用离心1. ...

g是离心力，与离心直径无关。
离心转速，是跟离心直径有关的。

niwanmao

燕燕 发表于 2017-6-26 12:14
请问老师，我每次都是按照这个步骤来染色的，每次检测都说CD25和Foxp3没染上，不知道哪里可能出现问题了？ ...

CD25染不上，抗体出问题可能性较大，但首先需要确定你的标本肯定有。
而foxP3会跟很多因素有关：破膜剂、抗体、Treg细胞是否存在等等。

暖希贤

请问老师第7步的加入350ul stain buffer可以用PBS代替么？

niwanmao

暖希贤 发表于 2016-1-16 20:42
请问老师第7步的加入350ul stain buffer可以用PBS代替么？

可以试试。

燕燕

请问老师，我每次都是按照这个步骤来染色的，每次检测都说CD25和Foxp3没染上，不知道哪里可能出现问题了？

winteran

请问下老师，这个protocol里面的350g离心转速，是用那种离心15ml离心管的离心机离心的转速吗？如果用离心1.5ml EP管的离心机是不是转速就得加大了。因为离心半径不一样，离心力还是有区别的。不清楚此protocol上的这个350g针对的是哪一种离心机而言？期待您的解答，这对我很重要，最近做胞内染色结果总是不理想，万分感谢。

zhihong

请问老师，因为时间关系，我是过夜后才上机检测的，最后一步是用4%多聚甲醛重悬待上机好呢，还是BPS重悬好？谢谢！

茵梦依521

zhihong 发表于 2019-7-5 11:38
请问老师，因为时间关系，我是过夜后才上机检测的，最后一步是用4%多聚甲醛重悬待上机好呢，还是BPS重悬好 ...

多聚甲醛

苏沁沁

niwanmao 发表于 2017-6-26 19:37
CD25染不上，抗体出问题可能性较大，但首先需要确定你的标本肯定有。
而foxP3会跟很多因素有关：破膜剂、 ...

倪老师、为什么甲醛固定后，表面分子染不上、核内分子还能染？