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JC-1 (5, 5´, 6, 6´-tetrachloro-1, 1´, 3, 3´-tetraethylbenzimidazol-carbocyanine iodide)是一种亲脂性荧光阳离子染料，可掺入线粒体膜，由于线粒体生理性膜电位的存在，形成聚集体。聚集后，JC-1的荧光性质就发生了改变，从绿光转换为橙光。完整的活细胞JC-1染色后，可显示线粒体显著的橙光，可被流式细胞仪FL2通道检测到，而凋亡细胞由于线粒体膜电位的降低，从而使得橙色荧光降低，而绿色荧光略增高。通过这种荧光变化，就可以使凋亡细胞和非凋亡细胞区分开来。
对于自配试剂的，JC-1一般用DMSO配成1000x储存液(5 mg/ml)。
如果是标记贴壁细胞，需先将JC-1储存液用培养基稀释至5 µg/ml的工作液（稀释时注意边稀释边振荡，以防止沉淀形成），然后再将加了JC-1的培养基加到贴壁细胞中，37℃孵育10分钟或室温15分钟，最后用PBS洗涤两次、胰蛋白酶消化，500 µl PBS重悬，上机分析。
如果是悬浮细胞，可将悬浮细胞与用培养基稀释至10 µg/ml 的JC-1溶液以1：1混合，最终浓度5 µg/ml，同样37℃孵育10分钟或室温15分钟，最后用PBS洗涤两次，500 µl PBS重悬，上机分析。
FL1和FL2大致的补偿如下：
FL1-7% FL2
FL2-74% FL1
示例结果：
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发表于 2014-6-12 23:14:12
楼主
发表于 2014-7-13 22:44:18
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